尖角突脐孢菌除毒素分析及该菌对水稻的安全性研究.pdfVIP

中文摘要 尖角突脐孢菌(Ex,serohilwnmonoceras)是一种能引起稗草叶枯病害的重要病原菌，其对稗 草致病性强，对水稻安全，是稗草生物防除的重要生防因子．本研究围绕尖角突脐孢菌除稗毒素 及其对水稻的安全性，采用了形态学及分子生物学的方法对由自然发病的稗草病样上分离获得的 尖角突脐孢菌进行了分类鉴定，建立了该菌在离体条件下的最适产毒体系，验证了毒素在该菌致 病中的作用，并初步明确了该菌对水稻的安全性机制． 借助形态学及分子生物学的手段，确定了3株分离自湖南水稻田及中国农业大学科学园温室 的稗草病样上的尖角突脐孢菌的分类地位．结果表明，3菌株与实验室已有菌株(3-9和X-27虽 然在菌落形态、产孢量以及致病性等方面存在一定差异，但5菌株的ITS序列相似性达98％以上， 且可与突脐蠕孢属其它种明显分开，表明3株分离物均为尖角突脐孢菌． 建立了尖角突脐孢菌在离体条件下的最适产毒体系．1)pH为6的改良Fries培养基；2)在 酸碱度对粗毒素活性的影响，表明粗毒素的活性不受高温及酸碱度的影响，可初步排除尖角突脐 孢菌在离体下产生的活性物质为蛋白的可能。粗毒素通过薄层层析进行初步分离纯化，经叶片生 测追踪不同组分的活性，表明组分7对稗草致害性强，对水稻相对安全，但该组分所含物质的化 学结构的确定尚待进一步研究． 场发射环境扫描电镜观察尖角突脐孢菌侵染稗草叶片，以及从发病稗草叶片中提取获得的 萃取液对稗草致害性检测的结果证明，尖角突脐孢菌在侵染稗草叶片的过程中伴随对其具致害 性的物质的产生，且该物质在尖角突脐孢菌对稗草的致病性中可能充当关键因素．发病水稻的 叶片提取物对水稻进行致害性检测的结果表明，提取物对水稻的致害性与水稻叶片的发病严重 度之间无明显的相关性，且水稻叶片的空白提取液也存在致害性。由此可以初步推断，毒素不 仅在尖角突脐孢菌侵染稗草的过程中起关键作用，而且还可能是该菌侵染稗草不侵染水稻的原 因之一。 试验从硅在尖角突脐孢菌．水稻不亲合互作中的作用及该菌与稗草和水稻互作差异的角度初 步探索了尖角突脐孢菌对水稻的安全性机制。结果表明，硅酸钠虽然不能直接抑制尖角突脐孢菌 的菌丝生长及孢子萌发，但是不能排除水稻叶表的硅化层在物理屏障方面的作用；尖角突脐孢菌 对水稻安全的机制在于水稻叶表特有的二氧化硅拓扑结构可能阻碍该菌的侵染，一旦用金刚砂摩 擦去除这一结构，该菌就可在水稻上表现出与在稗草上相同的侵染症状． 研究表明，尖角突脐孢菌可以在离体及活体条件下产生除稗活性物质，该物质中存在对稗草 致害性强对水稻安全的化合物。该菌对水稻安全的机制主要包括水稻叶表二氧化硅结构的物理屏 障及特有的二氧化硅拓扑结构的识别作用，以及毒素对水稻的不亲和性。本文的研究结果为以尖 角突脐孢菌为主要成分的生物除草剂的研发提供了理论依据，对于加速新型除稗剂的开发具有重 要的借鉴意义。 关键词：尖角突脐孢菌，稗草，水稻，毒素，安全性 Abstract Asall control monoceraashows to importantbiologicalagent,Exaerohilumstrong pathogenicity to this to saferice．In mostsuitable toxin／nv／trowas barnyardgrass,but study,the system produce inthe roleoftoxin of最monocera$Wasthe developed,the aggressiveness validated,and safety