链霉菌bm10株产抗植物疫霉菌抗生素的分离、纯化和结构鉴定.pdfVIP

摘 要 壤中分离筛选得到的一株生防茵，前期研究结果表明，BMlO菌株发酵液无菌滤液对香 蕉枯萎病菌l、4号小种(只删D川辨f．sp．c“6州sgra∞l、豫c“)、黄瓜枯萎病菌僻 (砌y幻础砌DM∞筇记f)、香蕉炭瘟病菌【∞Z沱fD打f娩“所聊甜s口口(Berk．etCun．)觚】等多种重 h、 要植物病原真落具有强烈抑制作用，B鹾lO菌株发酵液在套然光照8纛、紫外线辐射2 12处理24h和贮存6个月等条件下抑菌活性保持稳定，具 100℃加热1h、pH2至pH 有开发成农用抗生素的前景。本研究对链霉菌BMlO菌株进行了形态特征、培养性状和 生理生化性状的鉴定，对其产生的抗生素进行了分离、纯化、结构鉴定和对辣椒疫病防 治效果进行了田间小区试验，．其主要研究结果如下： 1．根据菌丝形态、孢子形状、在不同培养基上的培养特征及明胶液化、淀粉水解、 纤维素上生长情况、H2S的产生、碳源利用一系列生理生化特征，按照《放线菌的分离 菌株初步鉴定为链霉菌烬灰类群白浅灰链霉菌的一个新菌株。 2。建立了从BM王0菌株发酵液中分离纯化抗生素的技术方法。将预处理后的发酵 液，于45℃进行浓缩，经乙酸乙酯萃取三次，合并浓缩获得链霉菌BMlO菌株活性物 质的粗提。以辣椒疫霉为活性追踪测试萤，通过减压柱层析、氯仿．甲醇梯度洗脱、硅 胶柱层析、结晶和重结晶，获得了单组份活性化合物SR．1。其技术流程为：活性粗提 物质(17．3 (60一80网)硅胶拌样——减压柱层析，以氯仿．甲醇梯 g)——甲醇溶解， 活性部分——硅胶柱层析——结晶，重结晶——单一活性化合物SR．1，1rIC展开系统 检测纯度达97％。 3。通过理化性质和UV、1H．NMR、硌C．NMR等色谱分析，明确了sR．王是一个核替 结构一致。 。 。 4．根据SR．1的化学结构分析，经文献查询和多项实验，建立了链霉菌BMlO发酵 液中代谢产物SR．1含量检测方法，流动相：甲醇／水(VⅣ，1：4)，流量：O．6mUmin； 柱温：室温；检测波长：230n爨，277嬲；进样体积：10影blR=13．48min。求得回归 L、5 平均凰收率为99．34％，相对标准偏差RSD为0。7l％，不同容积的摇瓶中(羔己、2 ∥∥mL。 5．首次明确了丰加霉素对辣椒疫霉菌具有强抑菌活性，0．01 SR．1的抑菌效 m咖L 果达100％。田间小区试验结果表明，链霉菌BMlO菌株发酵上清液浓缩10倍液的防治 效果达89．96％，显著高于72％甲霜灵锰锌600倍的防治效果64．35％。 关键词：链霉菌，抗生素，分离纯化，结构鉴定，辣椒疫霉菌 n Abstract f幻mthe a controlisolated The BMl0wasbiologicalagent Virgm Sfr印fD朋吵c部straill HainaIl our forestsoilof naturereseⅣeof Province，Chinaby laboratoryin， Bawangung f锄entatjonof researchin