益生菌l.plntarump-8对肉鸡肠道菌群、肠道免疫和生长性能影响的研究.pdfVIP

摘 要 乳酸杆菌是肠道具有生理意义的菌群，以乳酸杆菌作为益生菌剂是近年崛起 P-8 的新型替代抗生素促生长剂绿色饲料添加剂。本论文以益生菌L．plantarum P-8 为试验菌株，从鸡肠道菌群、肠道免疫和生产性能三个方面评价Lplantarum 替代抗生素的可行性。并深入剖析肠道菌群与肠道免疫和肠道菌群与生产性能间 相互作用的内在规律，以期揭示益生乳酸菌调控肠道菌群发挥益生作用的机制。 本试验以玉米、豆粕型日粮为基础日粮，采用单因子随机分组的试验设计方 G)，饲喂添 G)，饲喂不添加抗生素的基础日粮；2组为抗生素组(Antibiotic 加金霉素和盐霉素的抗生素日粮；3组为驴8组(剧k8G)，饲喂不添加抗生 素的基础日粮，’但饮水投喂L．plantarum P-8和抗生素后 首先，采用454焦磷酸测序技术比较肉鸡摄入L．plantarum 42日龄肉鸡肠道菌群群落结构发生的改变。结果发现，饲喂益生菌和抗生素鸡 肠道细菌菌群群落结构均差异显著(pn∞)。其次，采用荧光定量PCR技术， 基于属和种的分类学层面，结合优势菌属、乳酸杆菌种和双歧杆菌种定量数据， P．8和抗生素后，7、28、42日龄肉鸡肠道菌群 精细解析肉鸡摄入L．plantarum P．8 在分类学地位属及种的层面发生的细微变化。结果发现，摄入L．plantarum 后，可显著提高7、28、42日龄肉鸡肠道中总细菌、乳杆菌属和双歧杆菌属数量 可显著降低7、28、42日龄肉鸡肠道中埃烯氏菌属数量(PO．Ot)；而采食抗生 素日粮，可显著降低28、42日龄肉鸡肠道中奇异菌属数量(尸D．01)。 于试验第42天，摘取脾脏、胸腺和法氏囊，计算免疫器官指数；采用ELISA 法检测14、42日龄肉鸡血清IgG和肠粘膜SIgA含量；采用荧光免疫组化法检 测14、42日龄肉鸡小肠粘膜、派伊尔结和盲肠扁桃体CD3+、IgA+细胞数量了 解其表达情况；利用流式细胞仪检测14、42日龄肉鸡脾脏、小肠上皮内、固有 表达水平。结果发现，抗生素组和LP-8组42日龄肉鸡胸腺指数法、氏囊指数和 P．8后，可显著提高14、 脾脏指数均显著提高垆a笏)：雏鸡摄入L．plantarum P．8可 显著提高肉鸡小肠粘膜、盲肠扁桃体CD3和Igh阳性细胞数以及派伊尔结Igh 阳性细胞数(尸D．01)。抗生素的摄入显著降低了42日龄肉鸡小肠粘膜Igi、派伊 P．8 细胞质量分数(PO．01)，42日龄肉鸡小肠粘膜、固有层CD4+T细胞质量分数和 食抗生素日粮，显著降低了42日龄肉鸡小肠固有层CD4+、CD3+T和盲肠扁桃 P．8使42日龄肉鸡肠道Bu．1和IL．12 体CD3+T细胞质量分数；摄入L．plantarum 显著高于对照组(尸D．05)。采食抗生素曰粮，肉鸡肠道IL．2、IL．4、IL—lO显著低 于对照组俨D．05)。 生长性能结果表明，LP-8组22--．42日龄肉鸡日增重显著高于对照组 (尸n∞)。 通过以上的实验结果，我们得出的总体结论是：具有益生特性的L．plantarum P一8能够存活于宿主肠道内，改善肠道菌群群落结构，减少有害菌的粘附、侵染、 定植，促进有益菌生长，增强肠道防御功能；对肉鸡的体液免疫、细胞免疫和肠 道相关淋巴