转44phpa10-42基因小麦分子检测与赤霉病抗性功能评价.pdfVIP

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2016-02-23 发布于贵州
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转44phpa10-42基因小麦分子检测与赤霉病抗性功能评价

英文缩略表目录摘要……………………………………………………………………………………………………………………．．1 1引言………………………………………………………………………………………………………………………．3 1．1小麦赤霉病研究进展……………………………………………………………………．3 1．1．1小麦赤霉病的流行特点及规律………………………………………………………．．3 1．1．2小麦赤霉病发病原因及防治方法……………………………………………………．．3 1．2小麦赤霉病抗性机制研究及进展………………………………………………………．3 1．2．1小麦形态结构与赤霉病抗性研究……………………………………………………．．3 1．2．2小麦生理生化与赤霉病抗性研究……………………………………………………．．4 1．2．3小麦赤霉病抗性的遗传研究…………………………………………………………．．5 1．2．4小麦抗赤霉病的转基因研究进展……………………………………………………．．7 1．3植物防卫反应基因………………………………………………………………………．7 1．3．1植物的抗病机制………………………………………………………………………．．7 1．4本研究目的意义与内容…………………………………………………………………10 1．4．1研究目的与意义………………………………………………………………………10 1．4．2研究内容………………………………………………………………………………11 2材料与方法………………………………………………………………………………．．12 2．1试验材料…………………………………………………………………………………12 2．1．1植物材料………………………………………………………………………………12 2．1．2病菌材料………………………………………………………………………………12 2．1．3酶、试剂及试剂盒……………………………………………………………………12 2．1．4引物及测序……………………………………………………………………………12 2．1．5主要设备………………………………………………………………………………12 2．2方法…………………………………………………………………………………………………………………。12 2．2．1质粒DNA的提取……………………………………………………………………．12 2．2．2基因组DNA的小量提取法…………………………………………………………．13 2．2．3聚丙烯酰胺凝胶电泳法………………………………………………………………14 2．2．4琼脂糖凝胶电泳法……………………………………………………………………15 2．2．5转基因小麦植株的初步筛选…………………………………………………………．15 2．2．6转基因小麦外源基因的PCR检测……………………………………………………15 2．2．7转基因小麦的Soutllem blo钍jng检测………………………………………………．．16 2．2．9转基因小麦的赤霉病抗性评价………………………………………………………2l 2．2．10转基因小麦的抗赤霉病生理分析…………………………………………………．．22 2．2．11转基因小麦的农艺性状调查………………………………………………………．．27 2．2．12籽粒总蛋白含量检测与分析………………………………………………………。27 2．2．13数据处理与分析……………………………………………………………………．．27 3结果与分析………………………………………………………………………………。28 3．1转印盘J阳韶基因小麦植株的繁育及初步筛选………………………………………。．28 3．1．1小麦植株的繁育………………………………………………………………………28 3．1．2 pmf基因的初步筛选…………………………………………………………………．．28 3．2．1 PCR检测…………………………………………………………………………………………………28 3．2．2 PCR产物序列分析……………………………………………………………………．30 blotting检测………………………………………30 3．3转励口JJ蚴基因小麦的Soumem 3。3