以玉米淀粉为原酶法合成海藻糖的研究.pdfVIP

摘 要 海藻糖是由两个葡萄糖分子通过a a，1—1键结合而成的非还原性双糖。当生物细 胞处于饥饿、干燥、高温、低温冷冻、辐射、高渗透压及有毒试剂等各种胁迫环境时， 胞内海藻糖含量迅速上升，对多种大分子都具有保护作用，从而保护生命本身。外源性 的海藻糖同样对生物体和生物大分子有良好的非特异性的保护作用，使其在分子生物学、 医学、食品工业、化妆品工业、农业等领域有广阔的应用前景。 目前国际上主要是通过低成本、商收率的淀粉转化法生成海藻糖，本课题立足于以 淀粉为原料，通过微生物酶的分子内转糖基作用合成海藻糖：并对产酶菌株及其培养特 性、MTS∞e和MTHase特性以及海藻糖合成工艺进行了系统的研究。 ／本实验首先通过对选定的实验菌株进行紫外线诱变选育，采用将菌株直接接种在固 体培养基上，立刻进行紫外线照射的方法，筛选出性能优良菌株sP，其生产性能比出发 菌株提高了7倍，而且能够保持一定的稳定性。通过对该菌株进行的形态特征鉴定、化 学分类鉴定和生理生化特征鉴定，表明该菌为藤黄灰链霉菌，简称ST412。 对菌株ST412培养特性的研究结果表明：在菌株ST412的产酶过程中，麦芽糖为最 7H20为最佳无机盐；通过正 佳碳源：蛋白胨和牛肉膏为最佳氮源：K2HP04和MgS04 交试验确定的最佳诱导培养基组合配方为麦芽糖1％、蛋白胨O．5％、牛肉膏O．2％、 该菌株在供氧充分条件下酶活力较高，所以选择500ml三角瓶中装100ml液体培养基为 最佳装液量，培养终点为培养后144小时。 的合成过程。粗酶液4C时的保存稳定性很差，不适宜在4C长期贮存。 本实验中，用平板式超滤膜对酶液进行浓缩，选用截留分子量1万的再生纤维素超 滤膜，温度控制温度在30C，压力控制在0．04Mpa以下对酶进行浓缩，酶液浓缩收率达 到60％以上． 实验中对海藻糖的合成工艺进行了系统的研究。首先采用单因素确定淀粉液化液浓 度为10％、液化30min，然后对其它五个影响因素采用五因素四水平正交试验设计进行 工艺优化。确定的最佳反应工艺为：反应温度40C，反应时间36h，缓冲液浓度0．IM、 关健词：海藻糖…MTS—ase，和MTHa辨藤黄灰链霉菌ST412淀粉 j7 o 、／ 、， 。。 onthe ofTrehaiosefromCorn StudiesSynthesis Amylose Method Enzymatic by ABSTREACT o Trehaloseisa disaceharide that a．1一l binds linkage non—reducing by glucosidic the inside cellwill two molecules．Trehalose rise to itself glUCOSe organism promptlyprotect it is at as when di