小麦条锈菌生理种与小麦互作系统chi和glu活性及条锈菌夏孢子显微研究.pdfVIP

ll。肃农业／、!≯2009扁…lj学位论义 摘要 条锈病是全世界小麦的主要病害之一，在我国曾多次流行造成严重损失。为 了降低小麦条锈病的危害，科技工作者对条锈病进行了大量的研究，但研究主要 集中在抗病品种选育和条锈病的化学防治方面，而在病原菌方面的研究相对薄 弱，对不同生理小种的鉴定至今仍依靠寄主植物。为了揭示小麦条锈病病原菌生 理小种之间的差异，本研究对当前流行的主要生理小种的显微和超显微结构进行 了观察；同时，以小麦品种铭贤169及条锈菌生理小种水4和条混合菌种为材料， 研究了小麦感病后几丁质酶和8-1，3．葡聚糖酶活性变化，以期为小麦条锈病病原 菌生理小种超显微结构研究、生理小种形态学差异和病原菌控制提供参考依据。 主要结果如下： 1．小麦条锈病主要流行小种显微结构差异。将小麦条锈菌生理小种条32号、 水源4号、水源14号、水源7号、HY8夏孢子接种于O．3克葡萄糖培养基上， 保存于4℃冰箱内。分别于8h、12h、24h进行荧光染色，观察夏孢子萌发及芽 管结合现象。发现成熟的夏孢子经荧光染料DAPI处理后，其细胞核在荧光显微 镜(x100)下呈淡蓝色荧光，所观察的5个生理小种夏孢子多为双核，经过24 个小时的培养后，HY8、水4、水7和水14均能看到明显的芽管结合现象，而 条32则无明显的芽管结合现象。 2．小麦条锈病主要流行小种超显微结构差异。通过5000倍扫描电镜观察， 5个被观察生理小种成熟夏孢子均出现原生质光泽度较强，并聚集有大量的脂肪 粒。细胞呈球形或卵球形，双核相近排列；在夏孢子壁上存在有大量圆椎状的突 刺。不同生理小种的表面刺突疏密程度不一，并有不同程度的凹陷。 3．几丁质酶和B．1,3．葡聚糖酶活性变化。利用分光光度法检测小麦幼苗接 种后10d内叶片中总酶液、细胞间隙液和细胞胞内液中几丁质酶和B．1,3．葡聚 糖酶活性变化情况。从总酶液中的酶活性变化来看，几丁质酶活性变化为铭贤 169．混合组合在2dpi就高出铭贤169．水4组合与不接种对照，然而在4dpi时， 铭贤169．混合组合酶活性略有下降，而铭贤169．水4组合叶片中j。‘性大幅上升 并且超出铭贤169．混合组合。之后，6dpi时铭贤169．水4组合叶”中酶活性又 Ir肃农业人学2009屙顾lj学1讧论义 立即下降至与对照相当的水平，铭贤169．混合组合中却再次出现酶活性高峰。铭 贤169．水4组合的B．1，3．葡聚糖酶活性在1．10dpi内始终都保持稳定的增长，而 铭贤169．混合组合在2dpi时酶活性达到峰值后逐渐下降。铭贤169．水4组合酶 活性快速上升，在lOdpi时达到峰值。在细胞间隙液中，几丁质酶活性在铭贤 酶活性高于铭贤169．混合组合，但是其高活性没有表现出持久的状态，随后始终 低于铭贤169．混合组合；而在铭贤169．混合组合叶片细胞(液泡)内的B-1，3一 葡聚糖酶活性所表现出的结果来看，铭贤169．水4组合的酶活性比铭贤169．混 合组合的活性高。 关键词：小麦条锈菌，几丁质酶，B-1，3．葡聚糖酶，荧光染色显微，电镜扫描 肃农业人学2009扁倾l。学位i仑义 Abstract Asoneofworldwidemaindiseases ofwheat，therustthatbrokeout stripe severaltimesinChina abouta loss．Toreducetheharmfrom brought rust， heavy stripe scientificand workershavecarriedona amountof technological large research， isf