小麦特殊材料r49的细胞生物学和分子生物学研究.pdfVIP

摘 要 本实验以利用“单体附加系染色体作载体转移外源DNA”的染色体工程新方法 创造的小麦-黑麦远缘杂交后代中选育出的一个品系R149为供试材料，在细胞生物学 和分子生物学的基础上，利用染色体C．分带技术，基因组原位杂交技术，蛋白质分 离技术，特异PCR技术等对R149品系作了较为系统的初步研究，试图发现该品系中 特异的外源DNA片断，为“单体附加系染色体作载体转移外源DNA”育种方法提供 一个可靠的证据，充分证实“小片段易位诱导理论”的可行性。结果如下： l用传统的细胞学技术检测R149品系结果表明：并无大片断的黑麦染色体片断， 但其表现出的某些黑麦特性说明R149品系具有小片段易位。 2．利用基因组原位杂交对材料R149，川农号系列小麦进行分析，发现对照的原位 杂交结果清楚地显示一对1RS／1BL易位染色体：而品系R149原位杂交结果显示在两 对染色体的特定位置，具有较为规则的杂交位点，初步判断有可能是小片段易位。 麦小片段易位系。 4．对扩增出的条带进行克隆、测序，并与黑麦扩增出的条带进行序列进行比较， 结果显示回收条带的DNA序列与数据库中公布的序列同源性可达95％，从而更为确 切地证实R149含有黑麦的染色体小片断。 与最初亲本绵阳11相同的非常优异的面包加工品质，品质得分lO。 6．进一步证明利用八倍体小黑麦与普通小麦的后代中选择单体附加系，再利用附 加单体遗传学上的不稳定性可以选育出比较理想的小片段易位系，与其它几种染色体 工程诱发易位反应的途径相比，具有相对简单，高效，易位片断小的特点，其在育种 学上具有深远的意义。 关键词：小麦 黑麦 小片段易位c．分带 基因组原位杂交(GISH)高分子量 谷蛋白 Abstract onthe wheatmatierialR149basedon Study special andmolecular cyto—biology biology and Wangxiang(Plantgeneticsbreeding) DirectedProf．Ren by Zheng—long are AdvancedwheatcultivarR149whose co[Pmonwheat(伢iticum parents brednewchromosome aestlvum)andcereals)isby rye(Secale engineeringways 1inesfor chromatin “Theuseofmonosomicaddition into rye transferringrye the insitu C-bandingtechnique，genome wheat”．Using andPCRstudiedR149cultivar proteinseperationtechnique Inorderto the of verifytheory“induction