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2，车间扩大培养 The End 种子罐的级数越多好还是越少好？ 种子罐的级数越少，越有利于简化工艺和控制，并可减少由于多次移种而带来染菌 的机会。但也必须考虑尽量延长发酵罐最终代谢产物积累的时间，缩短由于种子发芽、 生长而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率。 问题1 问题2 什么叫接种龄？以什么接种龄接种较好？ 指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。通常接种龄以 菌丝处于生命极为旺盛的对数生长期，且培养液中菌体尚未达到最高峰时较为合适。对于 年轻的种子接入发酵罐后往往会出现前期生长缓慢，整个发酵周期延长；过老的种子会引 起生产能力下降而菌丝过早自溶。 问题3 什么叫接种量？以什么接种量接种较好？ 指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。如大多数抗生素发酵的最适接种 量为7%-15%，由棒状杆菌进行谷氨酸发酵的接种量只需用1%。采用较大的接种量可以 缩短发酵罐中菌丝繁殖到达高峰的时间，但是，如果接种量过多，往往使菌丝生长过 快，培养液粘度增加，造成溶解氧供应不足而影响产物的合成。 * 1、培养基 生产过程中经常出现种子质量不稳定的现象，其主要原因是原材料质量波动。 如： 四环素、土霉素生产中，配制产孢斜面培养基用的麸皮，因小麦产地、品种、加工方法及用量的不同对孢子质量均有一定影响。 制备霉菌用的大米，其产地、颗粒大小、均匀程度不同，孢子质量也不同。 蛋白胨加工原料不同（如鱼胨或骨胨）对孢子影响也不同。 水质的硬度、污染程度对生产均有影响 水质的影响：地区不同、季节变化和水源污染，均可造成水质波动，影响种子质量。 菌种在固体培养基上可呈现多种不同代谢类型的菌落，氮源品种越多，出现的菌落类型也越多，不利于生产的稳定。 措施 培养基所用原料要经过发酵试验合格才可使用 严格控制灭菌后培养基的质量 斜面培养基使用前，需在适当温度下放置一定时间 供生产用的孢子培养基要用比较单一的氮源，作为选种或分离用的培养基则采用较复杂的有机氮源 2、培养条件 1）温度 2）湿度 不同湿度对龟裂链霉菌（产土霉素）斜面生长的影响 相对湿度 斜面外观 活孢子数（×108/支） 16.5～19 上部稀薄，下部稠，略黄 1.2 25～36 上部薄，中部均匀，发白 2.3 40～45 一片白，孢子丰富，稍皱 5.7 3）通气量 一般需保证充足的通气 温度对多数品种斜面孢子 质量有显著影响。 如 ：土霉素生产种子，在高于37℃培养时，孢子接入发酵罐后表现出糖代谢变慢，氨基氮回升提前，菌丝过早自溶，效价降低等。 制备斜面孢子培养基的湿度对孢子的数量和质量有较大影响。 3、培养时间和冷藏时间 （1）培养时间 一般来说，衰老的孢子不如年轻的孢子，因为衰老的孢子已在逐步进入发芽阶段，核物质趋于分化状态。过于衰老的孢子会导致生产能力的下降。 措施：孢子培养的时间应该控制在孢子量多、孢子成熟、发酵产量正常的阶段终止培养。 （2）斜面冷藏时间 斜面冷藏对孢子质量的影响与孢子成熟程度有关。 如土霉素生产菌种孢子斜面培养4天左右即于4?C冰箱保存，发现冷藏7~8天菌体细胞开始自溶。而培养5天以后冷藏，20天未发现自溶。 冷藏时间对孢子的生产能力也有影响。 如在链霉素生产中，斜面孢子在6℃冷藏2个月后的发酵单位比冷藏1个月降低18%，冷藏3个月后降低35%。 4、接种量 接种量大小影响到培养基中孢子的数量，进而影响菌体的生理状况。 影响种子质量 的因素及控制 接种量 种龄 孢子的质量 培养基 培养条件 四、种子质量的控制措施 1、培养基 营养成分适合种子培养的需要； 选择有利于孢子发芽和菌体生长的培养基； 营养上要易于被菌体直接吸收和利用； 营养成分要适当丰富和完全，氮源和维生素含量要高。 营养成分要尽可能与发酵培养基相近。 2、培养条件 （1）温度 （2）通气量: 在种子罐中培养的种子除保证供给易被利用的培养基外，有足够的通气量可以提高种子质量。 例如，青霉素的生产菌种在制备过程中将通气充足和不足两种情况下得到的种子分别接入发酵罐内，它们的发酵单位可相差1倍。 但也有例外，例如土霉素生产菌，一级种子罐的通气量小对发酵有利。 3、种龄 种龄：是指种子罐中培养的菌丝体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 通常种龄是以处于生命力极旺盛的对数生长期，菌体量还未达到最大值时的培养时间较为合适。时间太长，菌种趋于老化，生产能力下降，菌体自溶；种龄