影响山羊单精子质内注射（icsi）效果主要因素的研究.pdfVIP

摘要 本试验研究了影响山羊单精子胞质内注射效果的主要因素，以期在优化ICSI具 体处理措施的基础上，降低ICSI过程中机械刺激、生物刺激以及试剂(或药物)对 卵母细胞的损伤，提高精核解聚率(受精率)，进而改善ICSI的总体效果。 精子操作液中添加8％(g／m1)PVP与5％添加量相比可以保证较高的操作效率 (92．50％VS 小且一次注射成功率和受精率都比较高，适合于山羊ICSI研究使用。山羊卵母细胞 体外成熟26h和成熟28hICSI的卵裂率、桑椹胚率和囊胚率均极显著(或显著)地 高于成熟24h的相应胚胎发育率，适当延长卵母细胞成熟时间有利于提高山羊ICSI 的效果。精子操作液中添加肝素后使受精率由原来的46．67％提高到57．17％，精子显 微操作液中添加4099的肝素，对提高山羊ICSI的受精率具有一定的促进作用。ICSI 注射微滴中加CB组和未加CB组间的卵裂率差异不显著(78．57％VS72．92％， 冻精的ICSI受精率显著高于鲜精(52．21％vs 的研究，分为对照组(精子注射后，不激活)、试验一组(精子注射后，离子霉素 5min)三 5min+6．DMAP3h联合激活)和试验二组(精子注射后，离子霉素单独激活1 个试验组进行，结果为：对照组山羊ICSI胚被激活的效率较低(卵裂率仅为7．94％， 不能发育到桑椹胚)；试验一组和试验二组的卵裂率(78．40％和82．69％)、桑椹胚率 组各相应指标间的差异均不显著(PO．05)。卵丘细胞的有无及共培养对ICSI胚胎早 期发育的影响研究，试验一组(卵母细胞为裸卵且不作单层细胞共培养)、试验二组 (卵母细胞为裸卵，进行单层细胞共培养)和试验三组(卵母细胞带有部分卵丘，不 作单层细胞共培养)三个组卵裂率之间的差异不显著(尸O．05)，试验二组和试验三 9．30％和20．97％)均显著高于裸卵组 组的桑椹胚率(44．86％和46．77％)和囊胚率(1 Pn05)。 关键词：山羊；单精子胞质内注射；冻精；离子霉素；卵丘细胞；低氧环境 onmainInfluencesoftheEffectof Study IntracytoplasmicSperm Goat Injection(ICSl)in Author：Zhang Wenlong and Major：AnimalGenetics，BreedingReproduction Run-zi Supervisor：ProfessorSang Abstract The wasconductedto thetotal of study improve impactIntracytoplasmicSperm maininfluencesfactorstoICSI．IntheICSI Injection(ICSI)，byinvestigating process，test methodwasmodifiedsothatwecanreduce mechanical， oocytedamagebringingby and wecould a