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肺炎克雷伯菌脉冲场凝胶电泳及多位点序列分型技术的联合应用.pdf
·786·
·实验室研究·
肺炎克雷伯菌脉冲场凝胶电泳及多位点
序列分型技术的联合应用
高源 张砺李马超黄成任红宇周海健朱兵清李债王晓蕾邵祝军
【摘要】 目的联合使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)及多位点序列分型(MLsT)对肺炎克雷伯
菌进行分型研究。方法参照美国疾病预防控制中心及亚太地区PulseNet提供的PFGE相关标准
化操作程序，优化相关电泳条件，对某儿童医院于2005—2006年分离到的59株菌分型分析，对其
中高度相似性菌株进行MLST分型分析。结果59株菌经PFGE分型分析，可分成47个PFGE
型，19个PFGE群，具有高度相似性的菌株经MLST分型，其型别分别为ST-340、ST-342、ST-343、
结论具有PFGE高度相似性的肺炎克雷伯菌可以通过MLST进一步确认或区分。
【关键词】肺炎克雷伯菌；脉冲场凝胶电泳；多位点序列分型
in with
Molecularof置kbsieUa combination
typing pneumoniabypulse—fieldgelelectrophoresis
multilocus GAOYuanI，zHANG瞄，12Ma-chaoI。HUANG
sequencetyping Cknf，RENttong-yuI，
zHoU National
Xiao-lei2．SHA0 Institutefor
Hai-jianl。zHUBing-qin91．Hqianl．WANG Zhu-junl．1
CommunicableDiseaseControland CenterDiseaseControland
Prevention，Chinesefor Prevention。
Children’s
Being102206．China；2Chengdu HospitaZ
author：．s_黝0
Corresponding Zhujun，Email：shaozhujun@icde．en
To KlebsieUa methods
【Abstract】0bjectiwtype pneumoniathrough includingpulse-field
combinationwithmultiloeus Fourselected
gelelectrophoresis(PFGE)in sequencetyping．Methods
different totheStandard ProcedureofPuiseNetChina，wereused．11圮
EPs．referring Operating
of胁bsiella was afterenriched in
singlecolony pneumoniaquantified culture．Embeddingorganisms
with endonuclease
and DNAwere ProteinaseKandthen restrietion
agarosegenome lysed digestedby
Xba wasobtained PFGEandbandsmarkedwith
I．to through were
produceagarosegel．Fing
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