致病性猪链球菌主要毒力因子基因多重PCR检测.pdfVIP

·640· ·猪链球菌感染· 致病性猪链球菌主要毒力因子基因 多重PCR检测 王花茹 王长军 陆承平 潘秀珍 陶开华 唐家琪 【摘要】 目的建立多重PcR体系，实现猪链球菌毒力相关因子基因cps、mr声、e步厂(e声厂”)和 s一的同步检测。方法根据上述毒力因子基因核苷酸序列，设计和合成4对特异性引物，通过体系 和条件优化，建立多重PCR检测方法，并对72株种属背景明确的实验菌株(其中猪链球菌48株、阴 性对照株24株)及49株猪临床分离的链球菌样本进行检测分析。结果48株猪链球菌中，c声s2检 6．3％(3／48)、sb检出率为54．2％(26／48)，上述检测结果与菌株的毒力因子背景情况完全相符；24株 阴性对照和49株猪临床分离样本毒力因子检测结果均为阴性。结论多重PcR可用于猪链球菌毒 力相关因子cPS2、MRP、EF、Sly的基因检测，特异性和敏感性好，为该病快速诊断和分子流行病学调 查提供了新的技术手段。 【关键词】猪链球菌2型；毒力因子；荚膜多糖；溶菌酶释放蛋白；胞外因子；溶血素 Detectionof factorsof PCR W4NGH“盘一 Virulence～嬲sociated multiplexassay Sf唧fococc“ss“括by Xi“一j疥P押，了140Kni一^“口，TANG r“’，WANG(：h口理90“咒，LUC矗P咒g一户i以g，PAN Jin—qi．+．FjMa矗。咒g M已dici规已n扎d R已5已口，r矗j押srif“fP加r BiofBc^咒ic5，』、k卵面，zg210002，China (br，℃spo挖di灯gn“f^or：了1ANG-厂ia—qi，Email：tjq85(虫hotmail．com To and detectthefourvirulence—associatedfactorsof 【Abstract】objectiverapidlysensitively In s“妇，a PCRwas the ofthis distinct Sf旭pfo∞(’cMs multiplex developed．Methodspmcess reaction，four DNA were wasbasedonthe 2(and andthe targetsamplified．onetarget serotype 1／2)specificcpsgene otherswerebasedon 5甜i5 the S￡r印￡们0cc“5 mrp，已声厂(已Ⅳ’)ands匆gene，encodingMRP、EF(EF’)and of s“如．72 48strainsof s“i5and24strains SlyproteinsSrrP声￡ococc“s isolates，whichincluding Sf，℃声￡ococc“s All of control，and49clinical weredetectedbythe PCR PCR negative specimens multiplexassay．Results weredetected on1．2％ Withthe48 s“isstrains， products byelectrophoresisa