乳酸发酵研究进展摘要.pptVIP

米根霉工艺 米根霉能把葡萄糖转化为乳酸,亦能把淀粉转化为乳酸。 乳酸发酵的效率受菌丝体形状的影响很大,近来,采用菌丝菌球体(pellets)进行生产,菌球体可反复使用;采用气升式发酵罐。 一个发酵周期结束,停止通气,菌球体即沉淀,放掉发酵液,并加入新鲜培养基,即可进行第二轮发酵.可连续进行9个周期。 ②连续发酵工艺 连续搅拌罐反应器;葡萄糖;德氏乳杆菌。 在稀释率D为0.35-0.4h-1,最大乳酸产率为8.93g/(L?h),最大生物量产率为1.40g/(L?h). ③半连续发酵工艺 分割出一部分发酵液作为下一批发酵的种子.在一定次数的周期中,接种量越大产率越高.40%-50%接种量,及5-9次发酵周期,乳酸的产率可达5g/(L?h). 6.工艺控制 ①中和剂选择和pH控制 pH宜取的范围为5-7(降到4.5以下,细菌停止生长). 目前,所用的中和剂主要是碳酸钙,其次有液氨、 氢氧化钠、氧化钙等。 乳酸钙和硫酸进行酸解反应,得到粗乳酸.这是最常用最经济的方法,缺点是生成大量硫酸钙. 乳酸铵或乳酸钠经微滤膜过滤,再经电渗析,离交树脂和双极电渗析膜分离出乳酸,缺点是生产成本高(电和膜)。 ②发酵温度控制 不同菌种发酵温度不同.分常温(35-37 ℃),中温(40-45 ℃),高温(大于50 ℃). 选择高温发酵有利于降低能耗和在一定程度上降低杂菌污染. ③通气和搅拌 微氧乳酸发酵需少量通气和搅拌,一定保证发酵罐内菌体、物料、温度、 pH 、溶解氧的均匀分布. ④初糖浓度 在菌种能力范围内,初糖浓度越高,产酸越高; 补糖; SSF。 ⑤菌体生长的控制—生长耦联型,边生长边产酸.把生长控制在合适的范围内,有利于维持高产酸速率时间。 三.乳酸发酵的新工艺 1.电渗析发酵法工艺（乳酸根被阳极吸引） 电渗析发酵(electrodialysis fermentation,EDF)系统:主要有发酵罐、电渗析装置、pH控制装置、直流电源、微孔过滤装置、浓缩液储存罐、循环泵等组成. 发酵与电渗析分离耦合的工艺,优点是: ⑴在线分离,有效消除产物抑制; ⑵避免添加中和剂,使精制容易,缩短了发酵周期; ⑶无污染,过程简单,消耗工业原料少,易于实现自动化连续操作。 2.萃取发酵法 是根据一种溶质在两种互不相溶的液相溶剂中的溶解度不同而进行的分离方法。 乳酸萃取发酵是利用有机溶剂（叔胺Alamine336和油醇混合物）在线连续移去发酵产物乳酸,以达到降低乳酸抑制作用的目的技术。 萃取发酵能耗低,选择性好。 3.膜循环发酵法(membrance recycle fermentation,MRF)工艺 这是一种连续发酵工艺.把连续搅拌罐反应器与细胞循环膜组件相耦合.通过膜组件除去发酵液中的乳酸,消除产物的抑制作用,提高乳酸产率. 4.同时糖化发酵工艺 同时糖化发酵(simultaneous saccharification fermentation,SSF)工艺简化了单独用糖化酶糖化淀粉的工序,把糖化与乳酸发酵结合起来,在液化后加糖化酶的同时就进行乳酸发酵,从而节省整个工艺时间,节约了设备投资,降低了运行成本。另一好处是避免了初糖浓度过高造成的对发酵的抑制作用。 SSF还常用于廉价的纤维素原料。 米根霉、食淀粉乳杆菌本身产生糖化酶,能同时糖化发酵生产乳酸。 四.基因工程技术在改造菌株生产D-乳酸中的研究进展 随着基因工程理论的不断成熟发展，分子生物 学技术在D一乳酸生产领域的应用也逐渐受到关注，利用基因工程手段对菌株进行定向改造，减少了工程菌筛选的时间，提高了筛选效率。 目前研究的重点主要集中在乳酸生产菌的D-乳酸脱氢酶和L-乳酸脱氢酶的编码基因(ldhD和ldhL)上。另外还有研究人员对丙酮酸甲酸裂解酶的编码基因(pfl)和丙酮酸脱羧酶基因(pdc)进行敲除，从 而提高乳酸支路的通量。 应用基因敲除技术敲除旁路代谢途径中的关键酶基因，能够有效地抑制副产物的出现，提高乳酸支路的通量，同时敲除ldhL，最终能够得到高光学纯度的D-乳酸工程菌。进一步在基因敲除的基础上，通过导入外源性基因，使菌株的生产原料由葡萄糖和果糖等单糖原料逐步向淀粉和纤维素等多糖原料 转变。 当前基因工程改造菌株产D一乳酸主要集中在乳酸菌、大肠杆菌、酵母菌中。 4.1乳酸菌(Lactobacillaceae)的基因工程改造 在乳酸菌中，大部分丙酮酸都在乳酸脱氢酶的催化下形成其特有的代谢终产物—乳酸。但是，不同的乳酸菌在不同的外界条件下，