PI3K_Akt信号转导通路在ALV-J感染中作用的初步研究.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(16):3446-3453 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.16.018 PI3K/Akt 信号转导通路在ALV-J 感染中作用的初步研究 冯少珍，李 娇，吴晓婵，曹伟胜，廖 明 （华南农业大学兽医学院/农业部动物疫病防控重点开放实验室，广州510642 ） 摘要：【目的】探讨ALV-J 在宿主细胞中复制与PI3K/Akt 信号转导通路的关系。【方法】将血管瘤病变型ALV-J 毒株HN06 和骨髓瘤病变型ALV-J 毒株NX0101 分别感染DF-1 细胞，通过Western blot、Real-time PCR、IFA 和 ELISA 等方法，观察细胞Akt 蛋白磷酸化水平、病毒RNA 表达水平和病毒蛋白表达水平等指标。【结果】HN06 株和 NX0101 株在体外细胞中复制水平有差异。HN06 株的早期感染可引起Akt 转导通路的活化，病毒引起的Akt 磷酸化 具有病毒滴度依赖性，而且能被PI3K 特异性抑制剂LY294002 所抑制，表明HN06 株诱导的Akt 活化是PI3K 途径 依赖的。LY294002 可在病毒感染早期呈剂量依赖性地显著降低受染细胞中HN06 RNA 水平、囊膜蛋白水平和细胞 培养物上清中的病毒粒子含量。【结论】PI3K/Akt 信号转导通路活化对HN06 株在细胞感染早期具有重要的作用， 该结果与已报道的有关细胞PI3K/Akt 信号转导通路参与NX0101 株的早期感染的结论一致。本研究为进一步阐明 ALV-J 入侵宿主细胞和复制的精确机制等研究奠定了基础。 关键词：J 亚群禽白血病病毒；血管瘤；髓细胞瘤；感染早期；PI3K/Akt The Function of PI3K/Akt Signal Pathway During ALV-J Infection in DF-1 Cells FENG Shao-zhen, LI Jiao, WU Xiao-chan, CAO Wei-sheng, LIAO Ming (Key Laboratory of Animal Disease Control and Prevention , Ministry of Agriculture/College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642) Abstract: 【Objective 】 Given the biological importance of the PI3K/Akt pathway in virus infection, this experiment investigated whether or not the subgroup J avian leukosis virus (ALV-J) strain HN06 infection in DF-1 cells is correlated with the activity of Akt. 【Method 】After inoculation of ALV-J strain HN06 which mainly induces hemangiomas and strain NX0101 which induces myelocytomas in DF-1 cells, respectively, the expression levels of Akt phosphration, viral RNA transcription and viral protein synthesis were analyzed.【Result 】Results showed that the replicati