表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组活载体疫苗株的构建.pdfVIP

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2016-02-27 发布于安徽
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表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组活载体疫苗株的构建.pdf

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中国农业科学 2008,41(12):4230-4237 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.12.038 表达猪带绦虫六钩蚴TSOL18抗原的重组活载体疫苗株的构建 1,2 1,3 1 1 1 1,3 1 1 1 丁军涛，陈晓宇，骆学农，王颖，张少华，刘斌，郑亚东，景志忠，才学鹏 1 （中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室，兰州 730046 ； 2 3 中国农业科学院研究生院，北京 100081 ；甘肃农业大学，兰州 730070 ）摘要：【目的】构建表达猪带绦虫六钩蚴 TSOL18 抗原的重组鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。【方法】克隆并改造 TSOL18 基因，构建重组质粒 pYA3341-TSOL18，电转入鼠伤寒沙门氏菌终宿主菌株 X4550，体外鉴定重组菌 X4550（pYA3341-TSOL18）表达蛋白的免疫原性、稳定性、生长曲线、安全性和小鼠免疫试验进行评价。【结果】酶切鉴定和基因序列测定证实重组质粒构建成功；尿素-SDS检测有目的蛋白条带,Western Blot证实该抗原具有免疫原性；重组菌株在体外营养选择压力下可稳定地携带重组质粒传代繁殖；蛋白的表达对重组菌株的生长基本没有影响；小鼠实验证实重组菌安全可靠，二免后 ELISA 检测产生抗体。【结论】成功构建了能稳定表达 TSOL18蛋白的可口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550（pYA3341-TSOL18）。关键词：猪带绦虫六钩蚴；TSOL18；减毒鼠伤寒沙门氏菌；活载体疫苗 Construction of the Recombinant Live Vector Vaccine Strain Expressing Taenia solium oncosphere 18 Antigen 1,2 1,3 1 1 1 1,3 DING Jun-tao , CHEN Xiao-yu , LUO Xue-nong , WANG Ying , ZHANG Shao-hua , LIU Bin , 1 1 1 ZHENG Ya-dong , JING Zhi-zhong , CAI Xue-peng 1 ( Key Laboratory of Animal Parasitology of Gansu Province / State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology / Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046; 2 Graduate School of Chinese Academy of