不同抗倒性甜荞茎秆木质素合成关键酶基因的表达分析.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(9):1864-1872 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.09.20 不同抗倒性甜荞茎秆木质素合成关键酶基因的表达分析 胡 丹，刘星贝，汪 灿，杨 浩，李鹤鑫，阮仁武，袁晓辉，易泽林 （西南大学农学与生物科技学院/南方山地农业教育部工程研究中心/重庆市荞麦产业体系创新团队，重庆 400716 ） 摘要：【目的】测定不同抗倒伏能力甜荞品种在不同时期的茎秆木质素含量及其相关合成酶基因表达量，探 讨甜荞茎秆木质素合成积累的关键时期及其关键酶基因，为甜荞抗倒伏育种提供理论依据。【方法】用简并引物扩 增得到基因 CAD、CCR、F5H、COMT 和 CCOAOMT 的部分CDS序列，在NCBI数据库中进行比对分析；用紫外分光光度 法测定 4 个不同抗倒性甜荞品种在分枝期、盛花期和乳熟期茎秆基部第 2 节间木质素含量；用荧光定量 PCR （qRT-PCR）方法分析木质素合成途径中9 个相关基因PAL、4CL、C4H、C3H、CAD、CCR、F5H、COMT 和 CCOAOMT 的 表达，用 2-△△CT 法计算其相对表达量。用 Microsoft Excel 2003 整理数据和作图，用 SPSS 19 软件进行方差分析 和相关性分析。【结果】扩增得到 CAD、CCR、F5H、COMT 和 CCOAOMT 的 CDS 序列可用于设计后续荧光定量引物。 甜荞茎秆木质素含量从分枝期到乳熟期逐渐增加，不同抗倒性品种间，高抗倒伏品种木质素含量在各个时期均显 著高于易倒伏品种。基因 PAL、4CL、C4H 和 CCR 表达量在品种间和时期间均差异显著或极显著，CCOAOMT 在品种 间不显著，时期间显著， F5H 在品种间差异显著，时期间不显著，C3H、CAD 和 COMT 在品种和时期间差异均不显著。 从分枝期到乳熟期，各品种的 PAL、4CL、C4H、CAD、CCOAOMT、F5H 和 CCR 表达量均先增后减，在盛花期达最大值， 高抗倒伏品种表达量显著高于易倒伏品种；从分枝期到盛花期 COMT 表达量逐渐下降，易倒伏品种表达量显著高于 高抗倒伏品种，乳熟期高抗倒伏品种显著高于易倒伏品种；从分枝期到乳熟期 C3H 表达量无明显变化规律。木质 素含量与 PAL、4CL、C4H、CCOAOMT、CAD 和 CCR 基因表达量呈显著正相关,与 C3H 呈负相关，与 COMT 在分枝期和 盛花期呈负相关，乳熟期呈正相关，与 F5H 呈正相关。【结论】木质素含量与甜荞茎秆倒伏密切相关，抗倒伏能 力强的甜荞品种其茎秆木质素含量高；盛花期是甜荞茎秆木质素合成积累的关键时期； PAL、4CL、C4H、CAD、CCOAOMT 和 CCR 是甜荞茎秆木质素合成的关键酶基因。 关键词：甜荞；木质素；关键酶基因；荧光定量PCR；抗倒性 Expression Analysis of Key Enzyme Genes in Lignin Synthesis of Culm Among Different Lodging Resistances of Common Buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench) HU Dan, LIU Xing-bei, WANG Can, YANG Hao, LI He-xin, RUAN Ren-wu, YUAN Xiao-hui, YI Ze-lin （College of Agronomy and Biotechnology, Southwest University/The Southern Mountain Agricultural Engineering Research Center of the Ministry of Education/Chongqing Buckwheat Industry System Innovatio