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中国农业科学 2006,39(4):825-830
Scientia Agricultura Sinica
表达载体pCAGGS显著增强禽流感DNA疫苗的免疫保护效果
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姜永萍 ，张洪波 ，步志高 ，李呈军 ，赵有淑 ，王秀荣 ，于康震 ，陈化兰
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( 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，农业部动物流感重点开放实验室，哈尔滨 150001 ； 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，
3
兽医生物技术国家重点实验室，哈尔滨 150001 ； 农业部畜牧兽医总站，北京 100026 ）
摘要：【目的】将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真
核表达载体pCAGGS，构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5，以提高H5亚型禽流感 DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。
【方法】将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测
转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白，随之将pCAGGHA5 及pCIHA5分别以100 µg和10 µg剂量一次免疫3 周
龄SPF鸡，4周后用100 LD50 的HPAIV GD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。【结果】间接免疫荧光法和Western-blot
分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白，载体pCAGGS 表达水平显著高于载体pCI；免疫SPF鸡
后，100µg pCAGGHA5可形成5/5的免疫保护，100µg pCIHA5可形成2/4的免疫保护，10µg pCAGGHA5可形成对免
疫鸡5/5的免疫保护，而10µg pCIHA5 则基本不能形成免疫保护，pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。
【结论】鸡β-actin 启动子表达载体 pCAGGS 可显著提高 HA 基因体外表达水平和 H5 亚型禽流感 DNA 疫苗诱导的
保护性抗体免疫反应水平，增强免疫保护效果。
关键词：禽流感；H5亚型；鸡 β－actin 启动子；DNA疫苗；免疫保护
Enhanced Protective Efficacy of Avian Influenza DNA Vaccine
with Expressive Vector pCAGGS
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JIANG Yong-ping , ZHANG Hong-bo , BU Zhi-gao , LI Cheng-jun , ZHAO You-shu ,
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WANG Xiu-rong , YU Kang-zhen , CHEN Hua-lan
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( Animal Influenza Laboratory of the Ministry of Agriculture, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of
Agricultural Scienc
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