超高效液相色谱法分析稻米酚酸化合物组分及其含量.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(9):1718-1726 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.09.05 超高效液相色谱法分析稻米酚酸化合物组分及其含量 1 2 1 1,3 1 1 1 1 1,3 张 娜 ，王国祥 ，Abacar Jose Daniel ，刘正辉 ，丁承强 ，唐 设 ，李刚华 ，王绍华 ，丁艳锋 1 2 3 （南京农业大学农学院，南京 210095 ； 南京农业大学生命科学实验中心，南京 210095 ； 江苏省现代作物生产协同创新中心，南京 210095 ） 摘要：【目的】稻米酚酸化合物是天然抗氧化物的重要来源，本研究建立糙米和精米中酚酸化合物的超高效 液相色谱的定性定量方法，并分析其在籽粒中的分布特征。【方法】以没食子酸、原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲 酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸、异阿魏酸、2-羟基肉桂酸和反式肉桂酸14 种酚酸化合物标准品，对糙米和精米中酚酸进行定性和定量分析。色谱柱为 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 （2.1 mm×50 mm，1.8 μm-Micron），流动相为0.1%乙酸水溶液（A）/乙腈（B），柱温30℃，流速为0.5 mL·min-1 ， 采用梯度洗脱，洗脱程序为0—1 min，8%—10%B；1—2.5 min，10%—13%B；2.5—5.5 min，13%B；5.5—6 min， 13%—21%B ；6—6.5 min，21%—27%B；6.5—7.5 min，27%—50%B；7.5—9 min，50%—100%B；9—12 min，100%B； 12—12.5 min，100%—8%B。检测波长为280和325 nm。【结果】14种酚酸在8 min内完全分离，经质谱鉴定，精米及 糙米中检测出的物质共有11种，分别是没食子酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、阿 魏酸、芥子酸、异阿魏酸和反式肉桂酸。可进行定量分析的酚酸共 8 种，分别是对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、对 香豆酸、阿魏酸、芥子酸、异阿魏酸和反式肉桂酸，线性范围为5—220 μg·mL-1 2 (R =0.9994—0.9999)，检出限为0.002 —0.03 μg·mL-1 -1 ，定量限为 0.004—0.08 μg·mL ，回收率为 84.11%—114.43%。对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、对 香豆酸、阿魏酸、芥子酸、异阿魏酸和反式肉桂酸在精米和糙米中的含量差异显著，其中对羟基苯甲酸、香草酸、 丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、芥子酸和反式肉桂酸集中存在于胚乳外层中，精米/糙米含量百分比变幅为4.52%—16.73%。 而异阿魏酸在稻米籽粒中分布较均匀，其精米/糙米含量百分比达到45.86%。【结论】该方法简便、快速、准确、可 靠，不仅适合稻米中酚酸化合物的含量测定，而且对于其他谷物中酚酸化合物含量的测定也具有一定参考价值。 关键词：酚酸;超高效液相色谱；糙米；精米 Determination of Phenolic Acids in Rice by Ultra-High Performance Liquid Chromatography