硫利达嗪增强伊马替尼对慢性粒细胞白血病细胞K562的抑制作用及机制.pdfVIP

安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui 2015Nov；50(11) ·1597 · 硫利达嗪增强伊马替尼对慢性粒细胞白血病 细胞 K562的抑制作用及机制 牛 伶 ，夏雷鸣 ，刘 柳 ，李 坦 ，李 斌 ，鲍扬漪 ，刘 欣 摘要 目的 观察硫利达嗪(THZ)、伊马替尼 (IM)单药及 的患者可以存活8年，年死亡率低于2％[33。但随 联合对人慢性粒细胞 白血病 (CML)细胞 K562的诱导作用， 着 IM治疗经验的积累，其局限性也被广泛报道。 并探讨其机制。方法 采用 四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定 首先，IM不能清除患者体 内的白血病干细胞 (1eu． THZ、IM单药及联合对细胞的抑制作用，计算两药协同指数 kimiastemcells，LSCs)，目前认为LSCs是CML复发 (cI)。检测THZ、IM单药及联合对细胞凋亡的影响。West— 的根源 。其次，未获得完全分子学缓解 (complete elTlblot法检测凋亡蛋 白Cleaved—Bid、Procaspase3，凋亡调节 molecularremission，CMR)的患者在停药后出现复发 蛋 白Bcl一2、Bax、pPI3K、pAKT表达 的变化。结果 THZ16 I．LmolfL作用24h后 K562细胞增殖明显抑制，低剂量细胞 的比例可能超过60％，甚至达到 100％[51。目前大 毒性作用不明显。IM低剂量即有较强的细胞毒性作用，两 量 IM耐药病例被报道，但是具体机制 目前尚不明 药联合后经计算有较好的协同作用。根据 cI值选定药物浓 确 。寻找与 IM有协同作用的药物，发挥更好的 度作用K562细胞24h，流式细胞术结果显示，THZ单药组无 治疗效果成为新方向。多巴胺受体抑制剂硫利达嗪 明显细胞凋亡，IM单药组 、IM联合 THZ组均存在不同程度 (thioridazine，THZ)被广泛用于治疗精神类疾病和 的细胞凋亡 ，与对照组 比较差异有统计学意义 (P0．01)。 抗耐药结核菌感染。近来THZ抗多种恶性肿瘤方 Westernblot法结果显示各实验组细胞胞内Cleaved．Bid表达 面的作用被大量报道 J。该研究 旨在观察 THZ、 量增加 ，Procaspase3表达量 下 降。抗凋亡蛋 白 Bcl一2、 IM对 CML—K562细胞的效应，并对两药协同在凋亡 pPI3K、pAKT下调、促凋亡蛋 白Bax表达明显上调 ，各实验组 中的作用进行初步探讨。 与对照组比较，差异有统计学意义(P0．01)。结论 低剂 量THZ联合 IM对 CML细胞 K562具有显著的增殖抑制作 l 材料与方法 用，其作用较 IM单用作用强 ，THZ有 明确增敏 IM的作用。 与 IM、THZ单药组比较，IM联合THZ组 CleavedBid表达量 1．1 材料 上调、Procaspase3表达量下降，其杀伤机制可能与线粒体通 1．1．1 主要仪器 FACSCalibur流式细胞仪(美国 路及抑制PI3K—AKT通路均有关。 BD公司)；680全 自动酶标仪 (美 国BIO—RAD公 关键词 慢性粒细胞 白血病；硫利达嗪；伊马替尼；细胞凋 司)；8000DH型二氧化碳培养箱 (美 国Thermo公 亡；凋亡蛋 白；凋亡调节蛋 白 司)；CKX41型倒置显微镜(日本OLYMPUS公司)。 中图分类号 R737．9；R971．41