腐胺和脯氨酸对哺乳期仔猪空肠绒毛-隐窝轴上皮细胞的多胺代谢及Wnt信号通路的影响.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(8):1609-1615 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.08.15 腐胺和脯氨酸对哺乳期仔猪空肠绒毛-隐窝轴上皮细胞的 多胺代谢及Wnt信号通路的影响 1,2 2 2 2,3 1 2 王小城 , 熊 霞 , 杨焕胜 , 高 巍 , 龚 敏 , 印遇龙 1 2 （江西科技师范大学生命科学学院，南昌330000 ；中国科学院亚热带农业生态研究所，中国科学院亚热带农业生态过程重点试验室，长沙410125 ； 3 广西大学水产科学研究所，南宁530004) 摘要：【目的】研究腐胺和脯氨酸对哺乳期仔猪空肠绒毛-隐窝轴上皮细胞的多胺（腐胺、亚精胺和精胺）代 谢、Wnt信号通路关键基因的mRNA相对表达量的影响。【方法】选取18头 0 日龄的刚出生的三元杂交（长白×大 白×杜洛克）仔猪，随机配对分成 3 组，每组 6 个重复，每个重复 1 头猪，对照组，腐胺组和脯氨酸组，分别灌 喂等体积的生理盐水，5 mg·kg-1 -1 体重添加剂量的腐胺和 25 mg·kg 体重添加剂量的脯氨酸，到 14 日龄断奶，断奶 后3 d屠宰，分离空肠绒毛-隐窝轴的3个不同分化程度（绒毛顶端，绒毛中段和隐窝）的细胞，分别为F1，F2， F3。高效液相色谱法测定 F1，F2，F3 中的多胺浓度，RT-PCR 测定多胺代谢途径中的相关基因以及 Wnt 信号通路 中关键基因的 mRNA 相对表达量。【结果】1、在绒毛顶端细胞 F1 中，与对照组相比，脯氨酸组的腐胺、亚精胺、 精胺的浓度均显著增加（P ＜0.05），而腐胺组的多胺均无显著差异（P ＞0.05）；在绒毛中段细胞F2中，除了腐胺 的含量无显著差异外，脯氨酸组和腐胺组的亚精胺、精胺的浓度均显著高于对照组（P ＜0.05），且脯氨酸组的亚 精胺和精胺的浓度均显著高于腐胺组（P ＜0.05）；在隐窝底端细胞F3中，腐胺组和脯氨酸组的腐胺、亚精胺、精 胺浓度与对照组的浓度差异均不显著（P ＞0.05）。2、鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因在绒毛顶端上皮细胞 F1 中的 mRNA 表达量，腐胺组显著高于脯氨酸组和对照组（P ＜0.05）；精氨酸酶（arginase）在 F2 中的 mRNA 表达量，脯氨酸 组显著高于腐胺组和对照组（P ＜0.05）；sFRP3 在绒毛中段上皮细胞 F2 中的 mRNA 表达量，脯氨酸组的显著高于腐 胺组（P ＞0.05）；sFRP4在隐窝上皮细胞F3中的mRNA表达量，腐胺组显著高于对照组和脯氨酸组（P ＜0.05）。【结 论】添加了外源腐胺和脯氨酸，促进了哺乳期仔猪的空肠绒毛-隐窝轴上皮细胞的分化细胞的多胺浓度及促进了多 胺的代谢，而对未分化的隐窝细胞没显著影响，同时通过Wnt信号通路调控空肠绒毛-隐窝轴细胞的分化成熟。 关键词:腐胺；脯氨酸；空肠；多胺；Wnt Impact of Putrescine and Proline on Suckling Piglet Jejunum Villus - crypt Axis Epithelial Polyamine Metabolism and Wnt Signal Pathway 1,2 2 2 2,3 1 2 WANG Xiao-cheng