鸡bcl-2表达质粒的构建及其对转染细胞凋亡的影响.pdfVIP

鸡bcl-2表达质粒的构建及其对转染细胞凋亡的影响.pdf

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 2000, 33( 6): 88~ 94 Scientia Agricultura Sinica -2 bcl 1 2 1 张书霞 ,步志高 ,陈万芳 1 2 ( , 210095; ) : 构建了 CMV 驱动及牛生长激素 p ly A 加尾信号修饰的bcl -2 cDNA 真核表达 粒 pCDCB。 随后,采用脂 体转染方法,将扩增并纯化的 pCDCB 转染至培养的 SPF鸡胚次代单 1 1 层成纤维细胞( ) 内, 96 后收集全部贴壁及上清脱落细胞,用 检测 bcl-2的表达,用 CEF h D t bl t 流式细胞术测定其细胞凋亡率。结果, pCDCB 转染后 96h , bcl-2 在 CEF 中呈高度表达; CEF平 1 均凋亡率为 1. 14% , 明显低于转染空白载体 粒的对照组 7. 64% 的凋亡率, DN A合成期( S期) 细胞为 2 1. 58% ,也低于对照组。 结果证实鸡bcl -2 的表达可显著抑制体外培养 CEF凋亡进程 , 其效应与细胞 DNA合成和增殖无关。 : bcl-2 ; cDNA;真核表达 粒;转染;细胞凋亡 : 858. 31 :  : 0578-1752( 2000) 06-0088-07 S A B- /-2( B-cell lymph ma /leukemia-2 gene,bcl-2) 〔2〕 1985 - ( 14; 18) B t , bcl-2。, 〔3〕 〔4〕 〔5〕 、 、 bcl-2。bcl-2( pen reading frame, ORF) 233、 25 687u( Bcl-2) ,、 -2 76%、73% 7 1%。 19 Bcl α C ,, -2、 Bcl ,, C Bcl-2。 bcl -2 cDN A 1992 Yutaka Eguchi, 。bcl-2,bcl-2 cDN A ,,。 1  1. 1  ( Backman DU-70) , ( Pharmacia Bi tech ) , 2 ( Backman) ,( Labnet) , CO ,( Bect n Dickins n)。 Ⅰ、 Ⅰ、 4 ( ) Ec R Bam H T DN A Plasmid purificati n Qiagen : 1999-09-03    : ( N . : ( 1950-) , ,,,,。 6 : bcl -2     89 Pr mega, DN A, JM83, DIG B ehering Mannhein,

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