苏钟猪TLR4多态性及编码区C1027A功能分析.pdfVIP

中国农业科学 2012,45(6):1206-1214 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.06.020 苏钟猪 TLR4 多态性及编码区C1027A功能分析 1,2 1 2 1,2 1 刘 筱 , 方晓敏 , 邹晓龙 , 赵 芳 , 任守文 1 2 （江苏省农业科学院畜牧研究所，南京210014 ； 南京农业大学动物科学院，南京210095 ） 摘要： 【目的】研究苏钟猪TLR4 的多态性及其编码区第1 027 bp处突变对TLR4蛋白功能的影响。【方法】 采用PCR-SSCP 的方法检测 TLR4 在苏钟猪中的多态性并利用real-time PCR 方法检测不同基因型（CC型和AC型） 的猪肺泡巨噬细胞经脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导后，TLR4 及促炎症因子 TNF-α、IL-1β表达量的 变化情况，探讨该处突变对 TLR4 识别LPS的影响。【结果】①共检测到 3个突变：G962A、C1027A、G960A，其中 前两个为有义突变，且 C1027A 突变可引起编码氨基酸性质的改变；②LPS 能快速诱导猪肺泡巨噬细胞中 TLR4 及 促炎症因子 TNF-α和 IL-1β表达水平上调且 TLR4 编码区C1027A不同基因型（CC型和AC型）的猪肺泡巨噬细胞 （pulmonary alveolar macrophages，PAMs）对 LPS 的敏感性及反应强度存在显著性差异。【结论】苏钟猪TLR4 编码区的序列相对保守、多态含量较低，群体遗传变异程度较小。TLR4 编码区 C1027A 突变能影响 TLR4 识别 LPS 的能力，等位基因C为苏钟猪抗革兰阴性菌感染的优势基因。 关键词：苏钟猪; TLR4; PCR-SSCP; LPS; TNF-α; IL-1β Polymorphism of TLR4 and Function Analysis of C1027A in Suzhong Pig 1,2 1 2 1,2 1 LIU Xiao , FANG Xiao-min , ZOU Xiao-long , ZHAO Fang , REN Shou-wen 1 2 ( Institute of Animal Science, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014; College of Animal Science and Technology Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095) Abstract: As a significant pattern-recognition receptor, toll-like receptor (TLR) is essential for the