外源反-10，顺-12共轭亚油酸对体外培养牛乳腺上皮细胞SREBP-1基因表达和蛋白质合成的影响.pdfVIP

中国农业科学 2011,44(23):4892-4901 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.23.016 外源反-10，顺-12 共轭亚油酸对体外培养牛乳腺上皮 细胞SREBP-1 基因表达和蛋白质合成的影响 1,2 2 1 2 1 王红芳 , 刘红云 , 杨维仁 , 刘建新 , 杨在宾 1 2 （山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018 ； 浙江大学动物科技学院奶业科学研究所，杭州 310029） 摘要：【目的】旨在观察反-10，顺-12，共轭亚油酸（t10c12 CLA）对牛乳腺上皮细胞中甾醇调控元件结合 蛋白（SREBP-1）基因的表达和蛋白质加工的影响。【方法】本试验使用组织块培养法获得奶牛乳腺上皮细胞，使 用不同浓度t10c12 CLA处理乳腺上皮细胞后，用油红染色法检测胞质内的脂滴分布，Trizol法提取细胞总RNA，荧 光定量PCR法测定相关基因的表达量，试剂盒法提取细胞总蛋白，进行Western blotting。【结果】随t10c12 CLA 添加量的增加，细胞质内甘油三酯的含量逐渐降低。与对照组相比，75、112.5 和 150 μmol·L-1 t10c12 CLA均对 胞质内甘油三酯的积累有显著抑制作用（P＜0.05）。t10c12 CLA 的添加对SREBP-1 基因和参与SREBP-1 蛋白加工 调节基因的表达均无显著性影响（P＞0.05）。根据蛋白质电泳结果推测，t10c12 CLA对SREBP-1 前体蛋白的合成 并无影响，可能对SREBP-1 的加工活化产生抑制作用或对其分解产生促进作用。【结论】t10c12 CLA能抑制胞质内 甘油三酯的积累，对SREBP-1 基因的表达、蛋白质翻译均无影响，可能影响其加工活化过程和活性蛋白的降解过 程。 关键词：反-10，顺-12 共轭亚油酸; 牛乳腺上皮细胞; 甘油三酯; 甾醇调控元件结合蛋白 Effects of Exogenetic Trans-10, Cis-12 CLA on Genes Expression and Protein Synthesis of SREBP-1 Gene in Bovine Mammary Epithelial Cells 1,2 2 1 2 1 WANG Hong-fang , LIU Hong-yun , YANG Wei-ren , LIU Jian-xin , YANG Zai-bin 1 2 ( Department of Animal Sciences and Technology, Shandong Agricultural University, Taian 271018, Shandong, Institute of Dairy Science, Department of Animal Sciences and Technology, Zhejiang University, Hangzhou 310029) Abstract: 【Objective 】The