小麦NBS-LRR类抗病基因类似片段分离和定位.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(10):2022-2031 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.10.007 小麦NBS-LRR 类抗病基因类似片段分离和定位 1,3 2,3 2,3 1,3 2,3 史静东 ，张小娟 ，黄丽丽 ，韩德俊 ，康振生 1 2 （西北农林科技大学农学院，陕西杨凌712100 ； 西北农林科技大学植物保护学院，陕西杨凌712100 ； 3 西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌 712100 ） 摘要：【目的】利用同源序列法分离小麦NBS-LRR 类抗病基因类似片段，并验证其与小麦抗条锈病基因Yr26 之间的关系。【方法】根据已克隆R （抗病）基因的保守结构域（NBS-LRR）设计简并引物，采用巢式PCR （Nested PCR）技术对小麦Yr26 近等基因系材料Nan137 的基因组DNA 进行扩增；同时利用中国春缺失系对获得的抗病基因 类似片段进行染色体定位分析，利用Yr26 载体品种92R137 和感病品种Avcoet S （AvS）创制的F 后代群体验证 2:3 获得的片段与小麦抗条锈病基因Yr26 的关系。【结果】通过巢式PCR 方法，获得了4 个通读的小麦抗病基因NBS-LRR 类抗病基因同源片段R105、R181、R326 和R405，长度分别为369、589、528、618 bp；这4 个片段均具有典型的 NBS-LRR 类的保守结构域，其核苷酸相似性为 24.35%—38.36%。中国春缺失系定位结果显示片段R405 被定位于 Yr26 所在的小麦缺失系C-1BL-6-0.32 区段内，同时通过含196 个单株的小群体检测结果表明该片段与Yr26 共分 离。【结论】从小麦近等基因系材料Nan137 中获得了4 个RGAs 片段，其中片段R405 可能是小麦抗条锈病基因 Yr26 的候选片段，但需进一步验证该候选片段的真实性。 关键词：小麦；同源片段；巢式PCR；Yr26；NBS-LRR Isolation and Mapping of NBS-LRR Resistance Gene Homology Sequences from Wheat SHI Jing-dong1,3, ZHANG Xiao-juan2,3, HUANG Li-li2,3, HAN De-jun 1,3, KANG Zhen-sheng2,3 1 2 ( College of Agronomy, Northwest AF University, Yangling 712100, Shaanxi; College of Plant Protection, Northwest AF University, Yangling 712100, Shaanxi; 3State Key Laboratory of Crop Stress Biology in Arid Areas, Northwest AF University, Yan