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莆田黑猪供体细系建立及卵母细胞体外成熟和孤雌激活
福建农林大学硕士论文
中文摘要
莆田黑猪具有适应性强、耐粗饲料、生长快、 产仔多、抗病力强等特性。作为濒危
品种，亟待保护。随着体细胞核移植技术的发展，这种技术在保种上有了重要的应用价值。
本实验是基于保种目的的体细胞核移植技术的研究，研究了猪体细胞核移植相关技术
环节，主要内容如下：
1．供体细胞系的建立
利用不同的方法建立供体细胞系，比较了各种方法的优缺点，(1)利用组织块法和酶
消化法建立猪耳成纤维细胞系，(2)胰酶消化法和机械刮取法建立了输卵管上皮细胞系，
(3)分离培养猪卵泡液中的颗粒细胞。实验结果表明，由组织块法得到的猪耳成纤维细
胞系生长状态最好而且又能避免对猪只的损伤，是理想的建系材料。
2．卵母细胞体外成熟和孤雌激活
优化了卵母细胞体外成熟体系：(1)NCSU．23培养液培养的卵母细胞体外成熟率
熟率影响不大，但在孤雌激活后，卵裂率、囊胚率上，添加EGF的培养基效果更好(4)
经5℃冷藏和．18℃冻存的卵母细胞NCSU．23成熟培养基用于卵母细胞的成熟培养，其成
熟率，孤雌激活后的卵裂率、囊胚率均无显著差异(PO．05)。
率、囊胚率都无显著差异(P0．05)，以2．0kv／cm，601．ts，1DC的处理效果最佳。
关键词：猪；体细胞；核移植；卵母细胞；孤雌激活
福建农林大学硕上论文
Abstract
blackhadcharacterized litter
Putian size，
pig bygoodquality,s打ongadaptability,high
fodder．As
diseaseresistanceaswellas withcoarse endangered
strong feeding species，Putian
black tobeen
pigurgent protection．
withsomaticcellnucleartransfer valueand
Developing technique，itsimportantapplication
in researchfocusedonmainitemsof somaticnuclear
foregroundprotectingspecies．this Pig
as
transfer suchsomatic
systematically donors，recipientoocyte．
lines
1．Establishmentofdonorsomaticcell
Adultearskinfibroblastcelllineswereset methodand
upbyusingexplant—seedingenzyme
oviduct celllineswerealsoestablished and
trypsin
digestionmethod。Pigepithelium byscraping
from studiedand
metho
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