中国马传染性贫血病毒驴强毒株感染性分子克隆的构建.pdfVIP

中国马传染性贫血病毒驴强毒株感染性分子克隆的构建.pdf

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中国农业科学 2005,38(9):1898-1904 Scientia Agricultura Sinica 中国马传染性贫血病毒驴强毒株感染性分子克隆的构建 1 1 1 2 1 1 1 2 1 王晓钧 ,魏丽丽 ,相文华 ,张晓燕 ,吕晓玲 ,赵立平 ,朱远茂 ,邵一鸣 ,沈荣显 1 2 ( 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨 150001 ; 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心,北京 100050) 摘要:马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus, EIAV)驴强毒株 DV 是一株经过驴体传代获 得的而具有超强毒力的毒株,对马和驴均可100%致死。用PCR方法分段扩增了DV其前病毒基因,将包含全基因 片段的3个基因克隆以限制性内切酶消化后顺次连接克隆到pLG338上,命名为pD70344。将此克隆体外转染驴胎 皮肤细胞和驴白细胞,连续盲传3代并以反转录酶活性测定,RT-PCR 鉴定其病毒活性,透射电镜观察发现细胞培 养物中存在大量典型病毒粒子,证明获得了 1 株具有感染性的 EIAV 病毒粒子,命名为 pD70344V。经序列测定确 认了本试验首次构建了1株完全来源于EIAV强毒基因的感染性分子克隆,将此克隆病毒接种驴,可以引起典型的 马传贫症状并导致试验动物死亡。该分子克隆的建立为进一步考察病毒的毒力与基因的关系提供了良好的平台。 关键词: 马传染性贫血病毒;驴强毒株;感染性分子克隆 Development of a Molecular Clone of Chinese Equine Infectious Anemia Virus Donkey Adapted Strain 1 1 1 2 1 WANG Xiao-jun , WEI Li-li , XIANG Wen-hua , ZHANG Xiao-yan , LÜ Xiao-ling , 1 1 2 1 ZHAO Li-ping , ZHU Yuan-mao , SHAO Yi-ming , SHEN Rong-xian 1 ( Harbin Veterinary Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001; 2National Center for AIDS/STD Prevention and Control, Chinese Center Disease Control and Prevention, Beijing 100050) Abstract: An equine infectious anemia virus donkey adapted strain (designated as DV), which has lethal virulence to horse and donkey, was obtained through serials passaging in donkeys in vivo used a wide-type EIAV isolate. Three fragments covering entire genome of DV were amplified by PCR techniques from DV infected donkey leucocy

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