Ag+-TLC板中AgNO3含量一般为硅胶G量的2%~5%,对多个饱和甘三酯含量可增至15%~30%。AgNO3一般在调浆时溶于水中加入,也可用喷雾、浸泡等方式加入,Ag+-TLC薄板制好后应避光存放于干燥器中(硝酸银见光易分解)。 Ag+-TLC板分离甘油三酯常用的展开剂有两个系统,一类是弱极性的苯—乙醚系统,一类是极性的氯仿/甲醇、乙醇或乙酸体系。 甘油三酯有时也可用硼酸薄板进行分离,硼酸可以与羟基氧发生氢键作用,在薄板上硼酸对甘油基和游离羟基都会产生微弱的作用力,所以能较好地对1,3—甘二酯和α,β—甘二酯进行分离。 (一)甘油三酯的结构分析 1.sn-2位脂肪酸的分析 胰脂酶是一种选择性水解酶,在一定条件下选择性地水解甘三酯1,3位酰基,在一定条件下对sn-2位不水解。 测定时先用色谱法提取甘三酯,将游离脂肪酸、甘一酯、甘二酯、复杂脂质等组分分除去,然后用缓冲溶液控制pH值在7~8之间,加入胆酸钠或脱氧胆酸钠等乳化剂使其乳化,加入CaCl2使生成的脂肪酸皂化以促进反应的正向进行,最后加入盐酸中止反应。反应产物用乙醚提取,以己烷、乙醚、甲酸混合液(70:30:1)为展开剂进行薄板分离,展开后喷洒2,7-二氯荧光黄,在紫外灯下观察分离谱带,最前位置的是未反应的甘三酯,然后是游离脂肪酸、甘二酯,最后位置是sn-2甘一酯。分别刮下β-甘油一酯和脂肪酸谱带,甲酯化处理,用
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