cpg odn合热固化瘤苗对肝癌细胞hca-f荷瘤小鼠的免疫治疗研究.pdf

CpG ODN联合热固化瘤苗对肝癌细胞Hca．F荷瘤小鼠 的免疫治疗研究 硕士研究生：周大勇 指导教师：张阜然 教授 专业名称：病原生物学 摘 要 目的：肿瘤特异性主动免疫治疗是指采用各种肿瘤疫苗(简称瘤 苗，tumor vaccine)以诱导机体的抗肿瘤免疫功能，是预防肿瘤复发、 转移的重要途径，但在治疗肿瘤时往往由于肿瘤负荷和带瘤宿主免疫 倾斜等原因而治疗效果欠佳，需要一种免疫调节物质与其联合应用以 motifs)，是指一类以非甲基化 达到满意的治疗效果。CpG基序(CpG 的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸(CpG)为核心的寡聚脱氧核苷酸 ODN能非特异性激 (oligodeoxynucleotieds，ODN)，研究证明，CpG 活机体的免疫功能，尤其是细胞免疫功能，可作为免疫佐剂使用。我 motifs都分别做过抗肿瘤治疗的实验研究，证明了 室对瘤苗和CpG ODN具有 TvPBH就有较强抗肿瘤作用，可用于治疗，另外证实CpG 很强的抑瘤效果，能增强荷瘤小鼠的细胞免疫活性，但对肿瘤细胞无 ODN联合热固 直接的细胞毒作用。在此基础上，本次实验进行了CpG ODN对荷瘤小鼠免 化瘤苗的抗肿瘤免疫实验研究，进一步揭示了CpG ODN作 疫功能的调节作用及荷瘤小鼠免疫功能的变化特点，并为CpG 为治疗性佐剂的临床应用提供一定的依据。 方法：32只BALb／c小鼠随机分为4组，每组8只：生理盐水对 化瘤萌联合应用治疗组(CpG+T)。4组实验小鼠于荷瘤第2天，分别 ‘l‘ 射一次，共注射5次。15d后处死小鼠，剥取肿瘤称量平均瘤重，计算 抑瘤率、制备荷瘤小鼠NK、M中、CTL细胞并测定其体外杀伤活性、 检测荷瘤小鼠血清IL．12、IL．10含量。 结果： ODN 1．各组实验小鼠抑瘤率：瘤苗、CpGODN或瘤苗和CpG 联合使用均能抑制肿瘤生长，各组的抑瘤率分别为48．92％、75．o％、 86．67％，与生理盐水(N)组相比，其抑瘤效果具有显著性差异(D 0．05)；瘤苗+CpG联合应用组与瘤苗组或CpG组相比较，抑瘤效果也 具有显著性差异(p0．05)。 2．各组实验小鼠NK细胞杀伤活：与生理盐水组相比，单独使用 瘤苗时，不能增强荷瘤小鼠的NK细胞杀伤活性(p0．05)，单独使用 苗+CpG时，与生理盐水组相比可以增强荷瘤小鼠的NK细胞杀伤活性 (p0．05)，与单独使用瘤苗组相比较，效果具有显著性差异(p 3．各组实验小鼠CTL细胞杀伤活性：与生理盐水组相比，单独 使用瘤苗时，能增强荷瘤小鼠的CTL细胞杀伤活性(pO．05)，单独 合使用瘤苗+CpG时，与生理盐水组相比可以增强荷瘤小鼠的CTL细 胞杀伤活性(p0．05)，与单独使用瘤苗组相比较，效果具有显著性差 异(pO．05)，与单独使用CpG组相比较，效果也具有显著性差异(p 0．05)。 4．各组实验小鼠Mo细胞杀伤活性：与生理盐水组相比，单独使 用瘤苗时，能增强荷瘤小鼠的Mo细胞杀伤活性(pO．05)，单独使 使用瘤苗+CpG时，与单独使用瘤苗组相比较，效果具有显著性差异(p 5．各组实验小鼠血清中IL．12水平：与生理盐水组相比较，单独 使用瘤苗时，不能增高小鼠血清中IL．12水平(pO．05)，单独使用