家蚕微孢子虫蓖麻毒蛋白B链基因RBL463_4的克隆和在毕赤酵母中的表达.pdfVIP

家蚕微孢子虫蓖麻毒蛋白B链基因RBL463_4的克隆和在毕赤酵母中的表达.pdf

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Science of Sericulture 2010, 36( 6): 0957- 0961 ISSN 0257- 4799; CN 32- 1115/S E-mail: CYKE@ chinajourna.l net. cn BRBL 463-4 1, 2 1 1 1 1 1, 3 李能章 潘国庆 李 田 贾立丽 邓远洪 周泽扬 1 2 3 ( , 400716; , , 400715; , 400047) 基于家蚕微孢子虫(N o sem a bom byc is, Nb) 基因组中发现的蓖麻毒素 B 链( ricin B chain) 序列数据设计引物, 提取感染 Nb 天的家蚕幼虫中肠组织总 RNA, 利用 RT-PCR 方法扩增出RBL 463-4基因, 并将其克隆进毕赤酵母表达载体 pPICZA-A 中, 构建重组酵母表达载体 pPIC-R4重组质粒 pPIC-R4经SacÑ线性化后, 电击导入毕赤酵母 X33 中, 利用博莱霉素( zeocin) 筛选获得重组酵母 X33/RBL 463-4以 2% 甲醇诱导表达后, 经 SDSW estern blot检测表达产物, 结果出现 25 kD和 20 kD 2种蛋白, 其中25 kD蛋白与预测融合蛋白大小一致, 表明获得了 RBL463-4的融合蛋白研究结果为进一步探究RBL463- 4蛋白在家蚕微孢子虫侵染宿主过程中的功能作用奠定了基础 家蚕微孢子虫; 蓖麻毒素 B链蛋白; RBL 463-4基因; 毕赤酵母表达; 免疫印迹法 + S 4. 2 1; Q7 A 0257- 4799( 2010) 06- 0957- 05 C lon ing of R ic in B Cha in Gene (RBL 463-4) from Nosem a bom bycis and Express ion in P ich ia pastoris 1, 2 1 1 1 1 1, 3* LINeng-Zhang PAN G uo-Q ing LITian J AI L-iLi DENG Yuan-Hong ZHOU Ze-Yang 1 2 ( Institute o f Se ricu ltu re and System s B oi logy, Sou thw est Un vi ers ity, C hongq ni g 400716, C h ina; C hongq ing Key Lab o- rato ry o f Forage He rb ivo re, C o lleg e of Anmi a lS c ience, Ve te rinary and Aquacu ltu re, Sou thw est Un vi ers ity, C hongq ing 400715, C

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