3种苹果潜隐病毒多重RT2PCR检测体系建立.pdfVIP

园　艺 　学 　报 　2009, 36 ( 12) : 182 1 - 1826 A cta Horticu lturae Sin ica 3种苹果潜隐病毒多重 RTPCR检测体系的建立 1 1 1 2 1 范旭东 , 董雅凤 , 张尊平 , 李丽丽 , 裴光前 (1中国农业科学院果树研究所 , 辽宁兴城 125100; 2 沈阳农业大学园艺学院 , 沈阳 11016 1) 摘 　要 : 研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒 (App le stem g rooving virus, A SGV ) 、苹果褪绿叶斑病毒 (App le ch lorotic leaf sp ot virus, ACL SV ) 和苹果茎痘病毒 (App le s tem p itting virus, A SPV ) 的多重 R TPCR 方 法 。以复合感染 3种病毒的苹果 ‘望山红 ’组培苗为试材 , 对影响多重 PCR 的反应条件进行了一系列的调 整和优化 。多重 R TPCR 体系灵敏性测验显示 , 最低能从 RNA 总量 1875 ng 的样品中检测 3 种病毒的存 在 。多重 R TPCR 产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性 , 12 个田间苹果样品的多重 R TPCR 检测 结果与单一 PCR 的结果一致 , 初步证明了多重 R TPCR 检测的准确性 。 关键词 : 苹果 ; 多重 R TPCR ; 检测 ; 苹果茎沟病毒 ; 苹果褪绿叶斑病毒 ; 苹果茎痘病毒 中图分类号 : S 66 11　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2009) 12182 106 M ultiplex RTPCR A ssay for S im ultaneous D etection of Three L a ten t A pple V iruses 1 1 1 2 1 FAN Xudong , DON G Yafeng , ZHAN G Zunp ing , L I L ili , and PE I Guangqian (1R esea rch Ins titu te of P om ology, Ch inese A cadem y of A g ricu ltu re S ciences, X ing cheng, L iaon ing 125100, Ch ina; 2 Colleg e of H orticu ltu re, S heny ang A g ricu ltu ra l Un ivers ity, S heny ang 110 16 1, Ch ina) A b stract: The m u ltip lex R TPCR a ssay wa s e stab lished to sim u ltaneou sly detect App le s tem g rooving vi rus (A SGV ) , App le ch lorotic leaf sp ot virus (ACL SV ) and App le s tem p itting virus (A SPV ) . U sing tissue cu ltu re app le seedling (W angshanhong) infected by three laten t app le viru se s a s samp le, a serie s of factors affectin