小鼠脾单个核细胞的分离硕士班精要.pptVIP

免疫细胞 所有参与免疫应答以及与免疫应答相关的细胞均被称为免疫细胞。 包括淋巴细胞、单核-巨噬细胞、DC、各种粒细胞、红细胞、肥大细胞、干细胞。 免疫细胞的种类 免疫细胞分离方法： 根据不同免疫细胞表面标志: FACS;MACS 根据细胞理化性质： 1）根据细胞比重差异： 自然沉降法; 密度梯度离心法; 改变细胞密度法 2）根据细胞黏附特性：B细胞黏附于尼龙棉 3）根据细胞对渗透压变化的敏感度：红细胞对低渗敏感 密度梯度离心法原 理 根据物理学中颗粒沉降原理，不同密度的物质颗粒在其沉降运动中可因其比重的差别而处于不同的分布位置。利用此原理可设计一定比重的液体界面，将外周血中各种不同比重的细胞通过离心沉降而达到使其彼此分离的目的。 * 人外周血各类细胞的密度各不相同，血浆和血小板的密度较大，约为1.092；单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell， PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞，密度约在1.075。利用密度为1.077±0.001 g/L 的等渗葡聚糖-泛影葡胺（Ficoll-Urografin)分层液（又称Ficoll-Hypaque分层液、淋巴细胞分层液)进行密度梯度离心,可使血液中的各组分按密度不同梯度重新分布聚集。单个核细胞因密度略低于分层液，主要位于分层液和