一株猪繁殖与呼综合征病毒的分离鉴定、毒力及病毒蛋白的研究.pdfVIP

摘 要 本研究对来自临床的疑似猪繁殖与呼吸综合征的猪肺脏病料进行病毒分离，在 Marc．145细胞上分离得到一株病毒，定名为PP03。经传代后，细胞病变出现稳定， 以细胞圆缩、聚集、脱落为特征。该病毒接种Vero、PKl5细胞并盲传三代均不出现 细胞病变。 通过电镜观察可以看出该病毒粒子呈球形，有囊膜，大小为65-70nm左右，在细 胞中分布于细胞浆。通过免疫电镜可以看到病毒与抗体形成的抗原抗体复合物。在理 化试验中，该病毒56℃30min被灭活，对酸度变化较为敏感，在PH6．5．7．2环境中病 验最终证明PP03是一株PRRSV病毒。 在动物试验中，PP03很好的复制出了猪繁殖与呼吸综合征临床症状。PP03试验 猪表现出典型的呼吸症状，剖解可以看出其肺脏出现典型的间质性肺炎病变。采集发 病猪血清作ELISA抗体检测，可以观察到抗体效价在接种后的变化规律，接种后 10~20 d抗体水平出现急剧升高和降低，30d后趋于平稳并在其后一段时间内维持在 一个较高的水平。从发病猪肺脏再次成功分离得到一致的病毒。参考毒株ZM接种猪 未表现任何明显临床症状，剖解后肺脏亦无明显病理变化。通过ELISA抗体检测发 现，在接种ZM后10--24d抗体呈现温和的上升趋势，接种后28d达到较高水平后趋 于乎稳。在对ZM接种猪的肺脏进行病毒分离后亦得到相同的病毒。 通过SDS．PAGE蛋白电泳，我们分析了PP03的病毒蛋白，并与参考毒株ZM、 有微小差异，分析可能由不同毒株病毒蛋白成分糖基化的差异造成。经 抗体形成杂交条带，因而是不同毒株的共同抗原成分。 关键词：PRRSV 病毒分离 病毒蛋白 IsolationandIdentificationofthePorcine and Reproductive Virusand to Study RespiratorySyndrome Comparative Virus Virulenceand Proteins Chenjie(PreventiveVeterinaryMedicine) Directed byProf．XiongYah(SichuanAgricultureUniversity) Abstract The isolatedthe and respiratory virus， study porcinereproductive syndrome named theclinic material．Postinoculation PP03，from suspectedlung manytimes， theCPEinMare-145cell in features appeared sheddingstabIy． rounding，gathering Therewerebothno CPE whenthevirusinoculated cells any appearing Vero，PKl5 and three blindlygenerations． Intrans