一种新的分泌蛋基因nsp019的克隆和表达的研究.pdfVIP

5853 r 93 一种新的分泌置白基因NSP019的克离和表达的研究 中文摘要 一种新的分泌蛋白基因NSP019的克隆和表达的研究 中文摘要 目的克隆一种新的分泌蛋白基因，对其生物学特性进行研究，为开发 具有我国自主知识产权的有功能意义的新药奠定基础。 方法本研究应用生物信息学，寻找到一种新的分泌蛋白基因NSP019。 通过引物设计，用PCR方法，从人脑垂体cDNA库中克隆到此基因， 在与载体连接后，经核酸测序再分别导入原核和真核细胞进行表达，运 blot、Northern 用Western blot及亚细胞定位等方法，对克隆到的一种新 一 的分泌蛋白基因NSP019及其表达产物进行研究。 结果生物信息学分析显示，NSP019基因含5716个碱基，开放阅读框 架为726个碱基，翻译成共241个氨基酸的蛋白质，预计分子量约为 蛋白N一端有一段长度为32个氨基酸的疏水信号肽，并且含有一个谷胺 酰胺富集区。定位在第二号染色体上，含有五个外显子。 基酸，与生物信息学预测相符。Western blot及亚细胞定位证明NSP019 基因编码的产物为一种分泌蛋白，Northern blot显示其在人体多组织均 见表达。NSP019基因在原核系统中亦能表达，主要形成包涵体。通过 GST系统我们得到了NSP019的纯化蛋白。 结论本研究证实我们所克隆 NSP019是一个新的具有分泌性的蛋白 细胞发育、胞内蛋白的调控有关，可能在肿瘤发生、细胞凋亡、细胞保 护等方面发挥作用，其作用途径和机理有待进一步研究。 关键词分泌蛋白；基因克隆；基因表达 作者 祁小飞 指导老师黄瑞 韩泽广 此谭题为同象863谭题支持项目．(基金编号．102．08．084)1) 一种新的分泌蛋白基因NSPOl9的克匿和表达的研究 英文摘蔓 novel and ofa humanNSP019 expressing Cloning gene Abstract and of anovelhuman to Cloning NSP019 Objective expressing gene explore the new possibil时ofa drug． Methodsbin·inforrnatics Using so,ware computer Electronic-．Signm