中国汉族、维吾族、哈萨克族d3s1744、d18s849位点遗传多态性及法医学应用研究.pdf

中文 摘 要 前 言 、三碱基及四碱 队类基因组的基因及基因外区域含有二碱基 基时短串联重复顺序(shorttandemrepeat,STR)，又称微卫星 DNA，能提供大量的遗传标记，可用于法科学实践中生物物证的个 人识别及亲子鉴定等间题。随着研究的深人，现已知STR的重复 单位一般为2一6bp，重复次数从几次到几十次不等，多态片段长 度在400坤以下。STR位点的突出特点是基因组内位点多，多态 片段短，在生物性检材个人识别鉴定中实用价值姆高，高度腐败的 检材只要保存了靶DNA,STR位点就可能扩增成功，而且按孟德 尔遗传规律遗传，可用于亲子鉴定。目前，人们正把目光越来越多 地投向三核昔酸和四核昔酸微卫星DNA，因为它们比二核昔酸微 卫星DNA变异性更高，扩增更忠实，更易检测，且电泳图谱上没有 二核昔酸微卫星DNA常常产生的复合带纹。现在，国内外已经积 累了大量STR位点的群体分布数据，且在法医和遗传学中得到很 好应用。 多个STR位点的同时检测，即SIR位点的复合扩增，是PCR 技术上的一大进步，一次复合扩增同时获得多个STR位点的信 息，提高了个人识别能力，对微量检材鉴定特别有价值，尤其适用 于法医学检案。D3S1744和D19SS49两位点位于常染色体，由 Buetow,KennethH于1993年发现，核心序列都为TATC，国内尚无 有关这两个STR位点的群体遗传学数据 究应用聚合酶链 反应一扩增片段长度多态性(amplified lengthpolymor- phism,AMP一FLP)分析方法，调查了它们在辽宁汉族、新获维吾 尔族、新孤哈萨克族(以下简称汉族、维族、哈族)三个群体中等位 基因分布频率，为它们在法医学个人识别和亲子鉴定中的实际应 用提供了必需的基础数据，同时对两位点的复合扩增进行研究，并 探讨它们在法医学领域应用的意义。 材 料 与方法 \本研究应用聚合酶链式反应(PCR)，扩增两常染色体STR位 点D3S1744和D18S849，以聚丙烯酞胺凝胶电泳分离扩增产物结 合银染显带的方法，对142例无血缘关系的辽宁汉族个体，68例 无血缘关系的新疆哈族个体，54例无血缘关系的新疆维族个体， 进行多态性分析。同时，摸索D3S1744和D18S849的复合扩增， 并在血痕、精斑、混合斑检测及亲子鉴定和强奸杀人案例中应用。 结 果 在退火温度为6290,D3S1744和D18S849引物浓度比为0. 125pmol/L:0.25N,mol/L时，复合扩增产物的电泳谱型清晰，不同 位点的等位基因明显分离。 根据测序结果及国际通用的以核心序列重复次数命名等位基 因的原则，将D3S1744位点在无血缘关系的辽宁汉族、新获维族、 新疆哈族中检出的10种等位基因分别命名为等位基因10一19; D18S849位点在无血缘关系的辽宁汉族、新疆维族、新疆哈族中检 出的9种等位基因分别命名为等位基因9一15及17,190 D3S1744位点在142例辽宁汉族个体共检出由9种等位基因 构成的27种基因型，以基因型14一15频率最高，达到0.1830,9 种等位基因为等位基因10一18，等位基因频率分布范围为0.0040 一0.3730;54例新疆维族个体共检出由9种等位基因构成的21 种基因型，以基因型13一14频率最高，达到0.1850,9种等位基因 为等位基因10一18，等位基因频率分布范围为0.0090一0.2690; 68例新疆哈族个体共检出由9种等位基因构成的26种基因型， 以基因型12一14频率最高，达到0.1320,9种等位基因为等位基 因10-17及19，等位基因频率分布范围为0.0220一0.2940.(表 3,4)。 D18S849位点在142例辽宁汉族个体共检出由9种等位基因 构成的29种基因型，以基因型12一13频率最高，达到0.1340,9 种等位基因为等位基因9一15及17,1