原发免疫性血小减少性紫癜血小板蛋白组学诊断模型的研究.pdfVIP

目 录 1 目录……………………………………………………………1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………4 1.3 前言……………………………………………………………8 1.4 材料与方法……………………………………………………15 1.5 结果……………………………………………………………24 1.6 讨论……………………………………………………………35 1.7 结论……………………………………………………………4 1 1.8 参考文献………………………………………………………42 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………47 2 致谢……………………………………………………………49 3 数据挖掘的研究进展及其在临床医学中的应用……………50 4 在读期间发表的论文目录……………………………………58 原发免疫性血小板减少性紫癜血小板蛋白组学 诊断模型的研究 摘 要 背景：免疫性血小板减少性紫癜 （Immune thrombocytopenic purpura ，ITP ）是一种临床常见的免疫介导的出血性疾病，包括原发 免疫性血小板减少性紫癜（primary immune thrombocytopenic purpura ， pITP ）和继发免疫性血小板减少性紫癜 (secondary immune thrombocytopenic purpura ，sITP).其病因及发病机制至今都不是很 明确，免疫调节异常和自身抗体的产生可能发挥重要作用。pITP是指 原因不明的原发性血小板过度破坏的自身免疫性血小板减少综合症， 以皮肤出血、血小板计数减少、巨核细胞发育障碍、血小板生存时间 缩短及血小板膜糖蛋白特异性自身抗体出现为特征，且早期并无特征 性表现，脾肿大也不明显，只有血小板计数减少的血象改变，实验室 检查没有特异性指标，故其诊断仍是临床排除性诊断。sITP是指在某 些原发病的基础上发生的免疫性血小板减少伴随临床出血的症候群， 主要有疾病相关和药物诱导两种类型，如系统性红斑狼疮相关、奎宁 诱导等。其临床表现与pITP相似，早期难以鉴别。因此，建立一种能 够早期诊断ITP 的特异性实验室诊断方法是当前临床亟待解决的一个 课题，具有重要的临床意义和现实意义。 目的：本研究旨在探索一种简单快速、灵敏度高、特异性好的 ITP 实验诊断方法，为ITP 的诊断、病情监测、预后评价及个性化医 疗提供新的实验室依据。拟采用差异蛋白组学的方法，利用表面增强 1 激光解析电离飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption ／ ionization-time of flight-mass spectrometry ，SELDI -TOF - MS)检测 pITP 、系统性红斑狼疮、白血病、再生障碍贫血及正常人血小板蛋白 质谱，分别筛选出 ITP 和非ITP ，pITP 和sITP 的差异蛋白质组，再 结合人工神经网络（artificial neural network , ANN ）建立诊断模型和 鉴别诊断模型，并用SPSS17.0 进行盲法验证。 方法：1.样本收集：收集分别患有pITP 、系统性红斑狼疮、白 血病、再生障碍贫血等疾病的患者及正常人血液标本各60例，各疾病 组符合国际疾病分类与诊断标准第十版(ICD-10)的诊断。从收集的标 本中提取血小板蛋白质裂解液，并于-80℃冻存。2. 随机分组：将各 疾病组及正常人组标本分别按编号用随机数字表法分组为训练集和 验证集。训练集用于筛选ITP 的差异蛋白标志物并建立ANN诊断模 型，验证集用于模型诊断效度的盲法验证。3. 样本检测:应用SELDI