雷公藤红素对肝癌细胞SMMC-7721凋亡和周期的调控作用及机制.pdfVIP

2015年 6月 中成 药 June2015 第37卷 第6期 ChineseTraditionalPatentMedicine Vo1．37 No．6 [药 理] 雷公藤红素对肝癌细胞 SMMC-7721凋亡和周期的调控作用及机制 许阳贤 ， 宋海燕 ， 季 光 (1．上海 中医药大学附属龙华医院普外科，上海 200032；2．上海 中医药大学脾 胃病研究所，上海 200032) 摘要 ：目的 研究雷公藤红素对肝癌细胞SMMC-7721的增殖和凋亡的影响及机制。方法 应用CCK8试剂检测雷公藤 红素对SMMC一7721细胞的毒性和增殖影响，用软琼脂克隆形成试验检测药物对肝癌细胞的克隆形成能力的干预，通 过核染色及检测活化easpase-3水平观察细胞凋亡情况 ，用流式细胞术检测药物干预对细胞周期分布的影响，并用 Westernblot检测细胞周期相关蛋白细胞周期素B1(eyclinB1)及细胞分裂周期蛋 白2 (celldivisioncycleprotein2， cde2)水平。结果 雷公藤红素以剂量依赖性方式使 SMMC-7721细胞的增殖下降和克隆形成减少，使细胞凋亡增加 及细胞周期阻滞在G2／M期 ，同时增加失活cdc2表达 ，并导致 cyclinB1的积聚。结论 雷公藤红素可显著抑制肝癌 细胞 SMMC-7721的增殖并促进细胞凋亡，对分裂周期相关蛋白调控导致的分裂阻滞可能是影响其对细胞凋亡和增殖 作用的机制之一。 关键词：肝细胞癌 ；雷公藤红素；凋亡 ；细胞周期阻滞 中图分类号：R966 文献标志码：A 文章编号：1001·1528(2015)06—1153-05 doi：10．3969／i．issn．1001—1528．2015．06．001 Effectandunderlyingmechanism ofcelastrolonapoptosisandcellcycleinhepa— tocarcinomacelllineSMM C-7721 XUYang．xian ， SONG Hai．yan ， jIGuang (，．DepartmentofGeneral ，y，LonghuaHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai200032，China；2．In— stituteofDigestiveDiseases，ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai200032，China) ABSTRACT：AⅡ Tostudytheeffectandpotentialmechanism ofcelastro1onapoptosisandcellcycleofhepa— tocarcinomacelllineSMMC-7721．METHODS Cytotoxicityandtheeffectofcelastroloncellproliferationwere assessedbyCCK8assay．Colonyformationassaywasusedtodeterminetheinterventionofthecompoundforthea． bilityofcellgrowth andtumorigenesis．TheappearanceofcellularnucleiwasobservedthroughDAPIstain．Cell cyclewasdeterminedusingaflow cytometerafterPIstain．AndW esternblotwasused to detectproteinlevelof cleavedcaspase一3，cyclin B1andphospho—cdc2．RESULTS Comparedwith control，celastroldecreased cell proliferation，retardedcolonyfomr ationinadosedependentmanner．Thecompoundincreasedcellapoptosisand cel1cyclearrestatth