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中山大学博士论文 IL．2和lL．7在调控调节性T细胞和记忆性T细胞的产生和功能中的新作用机制 IL．2和IL．7在调控调节性T细胞和记忆性T细胞的 产生和功能的新作用机制 专 业外科学 博士生郭志勇 指导导师何晓顺教授 中文摘要 第一部分新生小鼠调节性T细胞的“默认刀产生机制 目 机制，尤其足在新生小鼠免疫系统发育时的Treg产生机制尚不清楚。本课题拟研究在不 同TCR束IJ激下新生小鼠T细胞转化成Treg的潜力。 方 法 能。体内实验部分，将CD3单抗腹腔注射入新生或成年小鼠体内，或将新生或成年小鼠 结 化率低于10％。这些新生小鼠Treg具有抑制功能并相对稳定地表达Foxp3。更重要的是， 新生小鼠这种“默认”转化成Treg的能力在出生后2周逐渐消失。与体外发现相符，腹 I 中山大学博士论文 IL-2和IL-7在调控调节性T细胞和记忆性T细胞的产生和功能中的新作用机制 生。 结 论综上，在TCR刺激时，新生小鼠T细胞在无外源性IL．2和TGF．D条件下， 内在地“默认”分化成Treg，而IL-7则可能限制了这种“默认”产生机制。 关键词新生小鼠，调节性T细胞，分化，IL．2，IL．7 第二部分IL．2信号通路限制获得性调节性T细胞前体细 胞的形成但诱导其Foxp3的表达 目 的胸腺来源的天然调节性T细胞(nTreg)产生的“两步模型”概念已被接受。 本研究将探讨外周是否也存在获得性调节性T细胞(iTreg)前体细胞，以及IL．2在形 成这些前体细胞和诱导其Foxp3表达的作用。 方 法 并予不同的细胞因子刺激，3天后用流式细胞仪测定Foxp3表达。建立“两步”培养法 研究影响iTreg前体细胞产生的因素。在“两步’’中的“程序化”阶段，予不同细胞因 子、中和抗体或通路阻断剂处理培养细胞。“程序化”处理3天后，在IL．2刺激下继续 表达的稳定性，体外和体内抑制功能分别通过3H．胸腺嘧啶摄入法和易激性肠炎模型进 行评估。 结 捧依赖性细胞因子没有类似效果。在CD4+T细胞接受TCR刺激的“程序化”阶段，抑 n 中山大学博士论文 IL-2和11．-7在调控调节性T细胞和记忆性T细胞的产生和功能中的新作用机制 能在Ragl-／-小鼠中预防由CD4+CD45RB晰ghT细胞介导的易激性肠炎的产生。 结 体细胞表达Foxp3。 关键词调节性T细胞，分化，Foxp3，IL-2，Jak3，Stat5 抑制CD4+CD25一T细胞活化中的协同作用 目 的关于Treg抑制功能机制目前已有多种观点，但这些机制间的相互作用尚未明 确。本研究旨在探讨其中两个重要机制——IL．2夺获与TGF—D在Treg抑制功能中的相 互作用。 方 增殖和存活情况。在某些抑制试验中，Tconv来自IL．2十小鼠或Bcl．2转基因小鼠。 结 果在体外抑制试验中，组成性表达Bcl．2的Tconv(体外培养中具有抗凋亡特性) 并不能逆转Treg的抑制作用。而通过增加钙内流、强化共刺激信号或加入细胞因子等 抑制幼稚性T细胞活化标记性分子的表达，提示Treg是通过抑制Tconv的早期活化介 不能有效抑制Tconv的活化和增殖。而两者联合作用能产生类似于Treg的抑制功能。 Transwell系统显示两者均参与了Treg的抑制功能。 结 中山大学博士论文 IL-2和lL-7在调控调节性T细胞和记忆性T细胞的产生和功能中的新作用机制 早期活化中发挥协同作用。 关键词调节性T细胞，抑制功能，机制，IL．2，TGF．13 第四部分 目 的在T细胞活化期多个活化(抗原，共刺激分子和细胞因子)信号均影响后续 记忆性T细胞(Tm)的产生。而IL．7受体不仅高表达于Tm，同时也高表达于幼稚性 方 测培养细胞的活化、增殖和存活情况，并通过过继输注入B6．SJL小鼠以监测Tm的产 生。 结 的活化、增殖和葡萄糖摄入。然而，IL．7能显著减少凋亡细胞的比例。过继输注6天培 养的OT-II 结 关键词记忆性T细胞，分化，IL．7，T