hif-1α、if-2α在不同级别脑胶质瘤中的表达与研究.pdfVIP

·中文论著摘要· HIF．1伐、HIF．2仅在不同级别脑胶质瘤中的 表达与研究 J．址．!刍 ． 刖昌 脑胶质瘤是颅内常见的恶性肿瘤，侵袭性强，术后复发快，是神经外科临 床工作中最棘手的难治性肿瘤之一。即使采用手术和术后放化疗等综合治疗， 目前为止临床治疗效果仍不尽人意。即使是相同病理类型及级别的胶质瘤，预 后也存在很大差异。治疗上的差异无疑是其重要的影响因素，但肿瘤内在的生 物学特性，特别是分子水平的差异才应该是关键所在。因此，深入研究胶质瘤 的分子生物学特征具有重要的理论和实践意义，近年来低氧诱导因子在肿瘤发 生发展和预后中的作用受到关注。缺氧诱导因子是一类介导低氧反应的转录因 子，能激活许多缺氧相关基因的表达，是在缺氧条件下维持氧稳态的关键性物 质。大量资料显示，HIFs与肿瘤行为的诸多重要方面均有关。首先，在实体瘤 内，很易观察到HIFs的活化：其次，细胞培养时，HIFs可调控与肿瘤相关的基 因的表达；第三，HIFs的失活对肿瘤模型的行为有重要作用。本研究应用免疫 组化方法，检测了43例胶质瘤组织中HIF．1a、HIF．2a的表达情况，探讨HIF．1a、 HIF．2a在不同级别胶质瘤中的表达情况。 材料与方法 ． 一、标本 2009年10月至2010年11爿M我院神经外科手术切除I-1．保存完好的 43例胶质瘤组织的彳倒}包埋标小。男24例，女19例，平均年龄42岁。 句i龄范…16—72岁。3例Il矧铷由}1I织为腑…ffIL于术时经歧Jz：造蝼切除的脑 组织，均经病理证实为正常脑组织。根据2000年WHO中枢神经系统肿 瘤分级标准，其中胶质瘤I级5例，胶质瘤lI级13例，胶质瘤IIl级21例， 胶质瘤IV级4例。 二、主要试剂 兔抗人缺血诱导因子．10【、兔抗人缺血诱导因子．20【购自北京博奥森公司， SP染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中山生物公司。 三、实验方法 ·常规PBS(pH=0．1)代替一抗作为阴性对照。染色步骤：石蜡切片60*烤箱烤 150 片15 ml微波 rain，梯度乙醇脱蜡至水，3％H202室温孵育15min，0．1％EDTA 素化二抗室温孵育35min，加链亲素酶标室温孵育30min，DAB显色lOmin，脱水， 透明．中性树胶封固。 四、结果判定 细胞核有浅黄色、棕色、棕褐色颗粒为阳性细胞，观察5个高倍镜视野(10x40 倍)阳性细胞所占比例，无阳性细胞或阳性细胞数1％为阴性，阳性细胞数 五、统计学分析 统计学处理采用SPSS19．0统计分析软件，采用X2检验计算I级、II级、 Ⅲ级、Ⅳ级之间的差异。P0．05为差异有统计学意义。 实验结果 1、HIF．1a、HIF．2a在正常脑组织中呈现阴性表达。 2、HIF．1a阳性染色主要定位于细胞胞核中，呈棕色、棕褐色颗粒。不同级 别胶质瘤中HIF．1a蛋白表达阳性表达分别为偏良性的肿瘤(I～II级)阳性率 为55．56％，其中大多相对染色淡，刚性细胞数少；偏恶性的肿瘤(III—IV级)阳 性率为88％，染色深，阳·陀细胞多。PO．05，有湿著性差异。 3、HIF．2a刚性染色●：要定位于细胞J也核l|1， 胞浆也有表达，呈棕黄色颗 级)15H性率为44．4％，其中大多相对染色淡，阳性细胞数少；偏恶性的肿瘤(IIl。IV 级)阳性率为84％，染色深，阳性细胞多。P0．05，有显著性差异。 结论 l、证实HIF．1a、HIF．2a在人脑胶质瘤中呈阳性表达。 2 2、HIF．1a、HIF．2a在高级别胶质瘤中的表达高于低级别胶质瘤。 关键词 胶质瘤；病理级别；HIF．1a：HIF．2a