抑制枯否细胞可减轻肝缺血再灌注引起的肾损伤.pdfVIP

一、摘要 中文论著摘要……………” 英文论著摘要……………” 二、英文缩略语………………· 三、论文 —t￡·，j一 刖吾………………………………” 材料与方法………………” 结果………………………” 讨论………………………………“ 结论………………………………” 四、本研究创新性的自我评价· 五、参考文献…………………· 六、附录 综j苤………………………………………………………………………………………………………”24 在校期间科研成绩………………………………………………………………·33 致谢…………………………………………………………………………………………………………34 个人简介…………………………………………………………………………35 ·中文论著摘要· 抑制枯否细胞可以减轻肝缺血再灌注引起的肾损伤 目 的 建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型，按时点采集标本，对血清尿素氮(BUN)， 血清肌酐(Cr)，肾组织脂质过氧化物的终产物．丙二醛(MDA)及血清中肿瘤坏死因 子(n师-a)进行测定；对肾组织进行MMP．2，MMP．9蛋白测定，探讨氯化钆抑制 枯否细胞对大鼠肝缺血再灌注所致肾损伤的保护作用及其机制。 材料与方法 1、材料 选择周龄为7--一8周雄性Wistar大鼠100只，体重为1 80一--2209，按体重随机 分为实验组(氯化钆+肝缺血再灌注)和对照组(生理盐水+肝缺血再灌注)。氯化钆 购自日本和光纯药工业株式会社；血生化相关试剂购自德国宝灵曼公司；TNF．a 试剂盒(美国BD公司)；丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)；兔 Cruz 抗大鼠MMP．9抗体(美国SantaCruz公司)；兔抗大鼠MMP．2抗体(美国Santa 公司)。HITACHI．7600A全自动生化分析仪；芬兰MultlskanMK．3型全自动多功 MP5．0／BX51显微图象分析系统。 能型酶标仪；图片分析采用MetaMorph／Evolution 2、方法 实验组术前24h、48h经鼠尾静脉注射氯化钆(10mg／kg)，对照组给予等量生 理盐水。参照Kobayashi法建立左半肝缺血再灌注模型(阻断左肝动脉、门静脉及 肝管)，缺血均为60分钟，按再灌注后O．5h、lh、6h、12h、24h时点采集标本， 每组每个时点10只大鼠。麻醉药选择10％水合氯醛，按3ml／kg计量腹腔注射给 药。免疫组化标本固定均采用4％多聚甲醛O．1mol／L磷酸缓冲液(pH=7．3)。经膈肌 心脏穿刺取血后，离心5min，留取上清液，血清由超低温冰箱保存，集中测定。 采用酶联免疫吸附法测定血清中TNF．伍的水平。取大鼠左肾，其中左肾中l／3肾 组织均浆后TBA法测定MDA；取左肾下l／3肾组织2xlx0．3era行免疫组化染色。 免疫组化结果在400倍光镜下观察，胞浆内出现棕黄色为阳性细胞。每张切片取 5个不重叠的高倍视野，测量IOD值，求出其均值，代表本张切片的平均IOD值。 IOD为累计积分光密度。所有计量指标均用mean士SD表示。所有数据均用专业 软件SPSSl3．0进行统计，采用f检验。 圣士 里 耋日7卜 l、血清BUN 再灌注后lh开始，实验组血清BUN低于对照组，且6、12及24h时点实验 组与对照组相比有显著性差异(PO．05)。 2、血清Cr 再灌注后，各时点实验组血清Cr均低于对照组，实验组在再灌注后6、12及 24h时点与对照组相比有显著性差异(P0．05)。 3、血清n盯．a 再灌注后，实验组各时点的血清TNF．0【均低于对照组，有显著差异(Po．05)。 且两组走势基本相同，12h达到高峰，之后有下降趋势。 ．4、肾组织匀浆MDA 再灌注后6h、12h、24h时点实验