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中国人喉鳞癌EGFR 突变基因的研究 硕士研究生：赖海春 导 师： 王德生 副教授 摘 要 目的：研究中国人喉鳞癌EGFR 基因突变情况 方法：1.QIAamp DNA Mini Kit 试剂盒法提取 28 例喉癌及其癌旁组织、10 例声带 息肉患者喉部正常组织DNA，采用突变富集PCR 法提取新鲜组织标本中突变EGFR 基 因，通过EGFR 基因突变液相芯片检测EGFR 基因突变的情况，从而比较肿瘤组织与 癌旁组织、肿瘤组织与喉部正常组织EGFR 基因突变的差异；2. QIAamp DNA Mini Kit 试剂盒法分别提取28 例喉癌患者手术前、手术后第1 天、手术后第5 天和手术后第 10天等不同时期共112份血清中的游离DNA，以突变富集PCR 法富集EGFR 突变基因， 通过EGFR 基因突变液相芯片的检测,观察肿瘤切除术前、术后EGFR 基因突变的动态 变化。 结果：1.喉部鳞癌标本28 例，组织表达EGFR 突变基因阳性者4 例，占全部病例数 的14.3％，4 例突变均位于外显子20 中，其中3 例突变类型为T790M，另外1 例突 变类型则尚未明确；癌旁组织以及喉部良性病变正常组织中均未检测出EGFR 基因突 变；但是这种比较在统计学上没有显著性差异（P 0.05）；2.112 份血清样本中， 术前血清只有1 例检出EGFR 突变基因，术后血清EGFR 突变基因阳性者总共7 例， 其中6 例突变位于外显子21，类型为L858R；1 例突变位于外显子20，突变类型为 T790M；这其中还有1 例同时具有外显子20、21 上突变，外显子21 上为L858R，外 显子20 上突变类型则尚未明确。从时序上看，患者血清中EGFR 基因突变似乎存在 动态波动性，但绝大部分都出现在手术后第5 天。但是，这些数据在统计学上仍然 没有显著性差异（P 0.05）。 结论：1.虽然喉癌组织中4 例存在EGFR 突变（占全部病例的 14.3%）,但与癌旁组 织、喉部正常组织比较无统计学意义（P0.05），因此认为喉部鳞癌中EGFR 基因突 变可能仅是偶然现象，尚不能作为检测中、早期喉癌存在与否或者指导肿瘤靶向治 疗的指标，需进一步扩大样本量深入研究。 4 2.血清中EGFR 突变基因的动态变化虽然在统计学中无显著性差别（P0.05），但我 们认为可能系病例数太少所致，而创伤或者别的原因可能是血清游离DNA 产生的可 能机制。因此，血清游离DNA 的来源机制有待进一步阐明。 关键词：喉肿瘤 鳞状细胞癌 EGFR 基因 基因突变 5 The Study on the Somatic Mutations of EGFR in Chinese Squamous Cell Carcinoma of Larynx Postgraduate: Haichun,Lai Tutors: Associate Prof. Desheng,Wang Abstract [OBJECTIVE] To detective the Epidermal growth factor receptor (EGFR) gene mutation in Chinese larynx squamous cell carcinoma and serum, and to analyze the affect of EGFR gene mutation detection in clinical works. [METHODS] The DNA was collected by QiAamp DNA Mini Kit. The EGFR gene mutations were examined in fresh tissues of 28 cases of laryngeal squamous cell carcinoma, adjacent nontumorous laryngeal epithelium a