自发性高血压大肥厚心肌和纤维化肾脏组织中microrna-21的表达.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………。1 英文论著摘要……………………………………………………………………”4 二、英文缩略语………………………………………………………………………·7 三、论文 前。言…………………………………………………………………………………………………………”8 刖舌…………………………………………………………………………………………………………” 实验材料与方法…………………………………………………………………10 实验结果(附论文图片)………………………………………………………12 讨论…………………………………………………………………………………………………………16 结论…………………………………………………………………………………………………………18 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………19 五、参考文献…………………………………………………………………………20 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………22 致谢………………………………………………………………………………‘28 个人简介…………………………………………………………………………29 ·中文论著摘要· 自发性高血压大鼠肥厚心肌和纤维化肾脏组织中 microRNA．2 1的表达 目 的 心血管疾病在发达国家长期以来一直是主要的死因，而且正快速变为发展中 国家的头号杀手。许多诸如高血压，缺血性心脏病，血管疾病，和内分泌紊乱的 心血管疾病的常见的病理反应是心肌肥大。因此心肌肥大是心血管疾病致死率和 病态的主要的一个决定因素。 心脏的病理过程和对心脏功能重要的基因的表达谱有关，MicroRNAs是最近 发现的一类调控基因表达的内源性非编码的小RNAs．它们的生物重要性，起初在 癌症，病毒疾病和发育过程被证实，最近在心血管生理和病理方面更多的被调查 在心脏方面，mieroRNAs单独或者联合的错误表达影响细胞结局，调节细胞 增长和分化之间的平衡，并且诱导或者影响心脏疾病状态，诸如肥大，纤维化， 电重塑和心律失常。 好几种MicroRNAs的上调或者下调与啮齿类和人类病理性的心脏重塑有关， MiR-21。许多研究得出一致性的结果MiR．21在肥大心脏中的表达上调。 本研究应用病理切片染色、real．timePCR等技术观察SHR大鼠和Wistar大鼠 心脏及肾脏组织中miR-21的表达情况，探讨miR．21在高血压致左室肥厚及肾脏 纤维化中的作用。 方法 一、模型制备 选择10只11周龄雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)作为实验组，年龄 性别相配的10只SPF级Wistar大鼠为对照组。所有大鼠均适应性饲养一周，后 实验组大鼠予以0．45％的氯化钠溶液饲养三周，对照组大鼠正常饮用自来水。所 有大鼠均于饲养四周后处死。立即取肾脏及左室心肌组织于．80℃冻存备用。 二、心脏肥大和肾脏纤维化的评估 通过心脏大小的组织病理学的分析，左心室重量指数(LvMI)即左心室重与 体重的比值(LVW：BW)来评估心肌肥大。通过组织病理学的分析来评估肾脏纤 维化。 三、miRNA检测 l、提取miRNA 2、检测miRNA．溶液浓度和纯度(OD260／280)。 3、加Poly(A)尾 4、反转录 5、PCR反应 结 果 1、心肌肥大和肾脏纤维化的鉴定 计算出两组左心室重量指数(LVMI)，实验组LVMI高于对照组，差异有统计 学意义。 所有实验动物均于15周龄时处死，同时病理检测其心肌组织及肾脏组织病理 改变。光镜下可见，实验组左室心肌细胞明显肥大，左室心肌及肾脏近髓皮质部 组织显著纤维化改变。对照组左室心肌细胞未见肥大的改变，心肌纤维化和肾脏 纤维化程度较轻。 2、肥大心脏和纤维化肾脏microRNA．21的表达 实验组大鼠microRNA．21在左室心肌和肾脏近髓皮质部组