znpchl;,1gt;介导的光动力疗法对血液恶性肿瘤细胞的生物作用及其机制的实验研究.pdf

ZnPcHl介导的光动力疗法对血液恶性肿瘤细胞的生物作用 及其机制的实验研究 研究生：陈万紫 导师：林东红黄慧芳 中文摘要 目 的：①探讨新型酞菁类光敏剂ZnPcHl介导的光动力疗法(ZnPcHl．PDT) 对血液恶性肿瘤细胞的杀伤作用及其机制，为PDT应用于血液恶性肿 瘤细胞的研究提供实验依据。②初步探讨ZnPcHl．PDT对血液恶性肿 瘤细胞的杀伤效应及其机制，为PDT的光损伤机制提供理论依据。③ 初步探讨ZnPcHl．PDT对慢性粒细胞白血病达形态学缓解骨髓的体外 净化作用，为提高造血系统肿瘤患者骨髓移植物中残存瘤细胞的PDT 狰化效果提供实验依据。 方 法： ①应用荧光光谱分析法检测光敏剂ZnPcHl含量正常骨髓单个核细胞 (mononuclear 巴瘤P388细胞、K562细胞内的动态变化，应用MTT比色法和细胞 细胞的生物作用；②采用AO／EB荧光染色法、DNA片段化分析、 mRNA表达的变化。③在正常骨髓MNC中 htert、survivin、caSpase．3 的表达情况：收集门诊慢性粒细胞白血病缓解期患者的骨髓标本，应 用荧光定量PCR检测PDT处理前后bcr／abl融合基因表达的变化。 结 量的动态变化存在差异：在与ZnPcHl共孵育5h时，CA46、P388、 K562细胞与正常MNC细胞内的ZnPcHl含量的比值较高。因此，选 用与ZnPcHl孵育5h后再行光照。MTT比色法与细胞集落形成实验显 P388、K562细胞的增殖，抑制率随光敏剂浓度的增加而增高；②AO／EB 均显示PDT能够诱导K562细胞凋亡，且呈时间依赖性。PDT处理后 mRNA表达呈时间依赖性增强。③细胞集落形成实验显示 而caspase．3 量PCR结果显示PDT处理后骨髓标本中bcr／abl融合基因的表达较对 照组有明显下调，抑制率为22．07％～99．07％。 结 内呈动态变化，能够选择性积聚于肿瘤细胞，杀伤血液肿瘤细胞，而 诱导细胞凋亡。其机制可能为下调c．myc、survivin的表达，从而下调 mRNA的表达，诱导其凋 htert的表达，抑制细胞增殖；上调caspase．3 亡。@ZnPcHl．PDT具有良好的骨髓体外净化效果，在自体骨髓移植 的骨髓净化方面有广阔的应用前景。 骨髓净化 4 StudiesofThe Effectsand Experimental Biological Mechenics of On ZnPcHl--Based·-PhotodynamicTherapyHematologic Cells Neoplastic Wanzi Postgraduate：Chen Tutor：Prof．Lin Donghong Prof．HuangHuifang Abstract the of