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SPARCL1 在胃癌中的表达及其 对预后的影响 摘 要 目的 SPARCL1，也称为Hevin, MAST9, SPARC 家族成员之一，是一种细胞外基 质糖蛋白，参与细胞的增殖、分化等多种生理功能，在内皮细胞的粘附和转运等 过程中起着重要的生物学作用。Hevin 最初是从人扁桃体淋巴组织的高内皮静脉 中（High endothelial venules ）分离出来的。高内皮微静脉是淋巴组织中的一些特 殊的圆形的毛细血管后微静脉，与普通血管中扁平的内皮细胞不同，有利于血液 中高水平的淋巴细胞进入淋巴系统。以往有关该基因的研究局限于基因结构方 面；近年对该基因的研究逐步扩展到神经系统和包括前列腺癌、非小细胞肺癌、 肝癌等在内的实体瘤中。相关研究表明SPARCL1 在绝大多数肿瘤中表达下调， 起着肿瘤抑制作用，但在肝癌和子宫肌瘤中的研究发现时高表达的。因此目前有 关该基因的研究尚存在一定的争议，其在肿瘤中的作用机制尚不十分清楚。本课 题旨在探索SPARCL1 蛋白在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理参数和预后 之间的关系。 方法 利用组织芯片技术构建包含1,072 例胃癌患者的大样本组织芯片（含胃癌组 织和癌旁正常组织）。利用Real-time 定量PCR 、半定量PCR 、免疫组化（IHC ）、 免疫印迹等实验技术分别从mRNA 水平和蛋白水平来检测SPARCL1 mRNA 和 SPARCL1 蛋白的表达情况，比较其与临床病理参数以及与胃癌患者预后之间的 关系。并同时通过 PCR-SSCP 的方法检测 10 对胃癌组织和正常组织中不同 SPARCL1 基因位点（SPARCL1，D4S2929 ，D4S2462 ）的杂合性缺失情况。 计数数据采用χ2检验方法，单因素的比较采用t检验。单因素生存分析采 用Kaplan–Meier 生存分析法，多因素生存分析采用Log-rank 生存分析法。统计 分析和作图采用Microsoft Office Excel 2003 和SPSS13.0 软件包。P 0.05 认为具 有统计学意义。 结果 1,072 例胃癌组织芯片的免疫组化结果提示，413 例（38.7% ）出现SPARCL1 蛋白的低表达。qRT-PCR 和 RT-PCR 结果均显示，与正常组织相比，SPARCL1 mRNA 在癌组织中的表达明显下降。χ2 检验表明SPARCL1 的表达与组织类型， 肿瘤大小，浸润深度，淋巴结转移，TNM 分期以及分化明显相关，具有统计学 意义。从 Kaplan–Meier 生存曲线可以看出 SPARCL1 阳性患者生存时间长于 SPARCL1 阴性患者 ( 中位生存时间：59 月 V.S 28 月, P = 0.001). 我们的研究结 果表明胃癌患者中，SPARCL1 低表达的五年生存率(37.8%) 明显低于高表达者 (49.7%) (P 0.001) 。多因素生存分析提示SPARCL1 在高中分化、无远处转移的 胃腺癌患者中可能作为一个独立的预后因素而存在。各位点的杂合性缺失情况如 下：D4S2462 ，12.5% (1/8)；D4S2929 ，20% (2/10) ；SPARCL1，33.3% (3/9) 。 结论 本研究揭示了SPARCL1 蛋白在胃癌组织中的表达情况及其与临床病理参数 之间的关系。SPARCL1 表达水平的下调，提示它可能在胃癌发生发展中作为一 种阴性事件而存在，影响着胃癌患者的预后。同时，本实验首先对SPARCL1 的 低表达的机制进行了初步的探讨，为该基因在肿瘤发生发展中的研究提供了一定 的基础，也为胃癌个体化治疗和临床研究提供了可能的分子靶标。 关键词 胃癌；SPARCL1；杂合性缺失；预后 The expression of SPARCL1 in human gastric cancer and its effect on prognosis Abstract Objective SPARC-like protein 1(SPARCL1), a membe