tat-hox4蛋白扩增人脐血cd34阳性细胞及其体内生理活性评价.pdf

中文摘要： 细胞，其在NOD／SCID多重免疫缺陷小鼠体内生理活性。方法：以GFP融合蛋白 及西方墨点法检测公司所提供的TAT-HOXB4蛋白进入细胞的能力；将新鲜的婴儿 蛋白作为人脐血CD34阳性细胞的扩增因子，以体外培养方式扩增人CD34阳性细 胞、MNC细胞。收集扩增后的细胞，经流式细胞仪检测及显微镜下计数，对比扩 将扩增后人脐带血来源CD34阳性细胞以尾静脉注射方式殖入小鼠体内，评价扩 增后细胞的活体内分化能力。结果：TAT-HOXB4蛋白能有效进入真核细胞细胞核 观察，能观察到TAT—HOXB4一GFP有效进入细胞核中，以免疫印迹法检测经 进入细胞能力良好。实验室先前试验已经得到HOXB4扩增细胞的最佳浓度与最佳 处理条件。在此条件下CD34阳性细胞可被有效扩增，对比于对照组，实验组MNC 数目增加3倍，CD34阳性细胞增加6倍。扩增后的细胞，经尾静脉注射人照射后 的多重免疫缺陷小鼠NOD／SCID后，能分化成为淋系祖细胞及成熟细胞，证实其 保有分化能力。结论：TAT—HOXB4蛋白具有进入真核细胞的生物活性，并且在进 入细胞核后，有扩增造血细胞的活性，扩增后的细胞保有干细胞表面标志，且体 分化能力。 关键词：TAT—HOXB4蛋白，CD34阳性细胞，扩增 4 HumanCD34+cord bloodcellsexvivo TAT．HOXB4 expandedby Can NOD／SCIDmice protein repopulate hematopoieticability Abstract Thehumancordblood isan sourceof stemcellsboth important hematopoietic for and transplantation isabout0．5％CD34 genetherapyapplication，which positive cellin thecord cordbloodcollection blood．However,a notbesufficient single may to ofadult guarantee engraftment allogeneicrecipients． Itisa to stem greatchallenge themostuseful expansehematopoieticcells，and isthedifferent orthe way cytokines transfection．Itwasinterestedin gene powerful intrinsic ofHSCself-renewalinvitro andinvivo．Thehuman agonist homeoboxB4