急性小肠梗阻时清dao、mda及肠壁组织学变化的研究.pdfVIP

中文摘要 急性小肠梗阻时血清DAO、MDA及肠壁组织学变化的 研究 摘 要 目的：肠梗阻是外科常见的急腹症之一。肠梗阻可导致 复杂多样的病理生理变化，近年来对肠梗阻后的全身病理生 理变化的研究不断提高，包括肠蠕动增加，肠腔积气积液， 肠壁充血水肿，缺血缺氧、感染中毒等诸多方面，两且其也 可引起肠管本身解剖与功能上的改变。随着诊疗水平不断提 高，它的确诊率和死亡率都有很大程度升高和降低，但临床上 对于肠梗阻特别是+JL肠梗阻如何及时、准确地做出诊断及 制定出相应的治疗措施仍存在分歧，仍是临床上一个需要解 决的课题。 急性肠梗阻时病情的演变与肠壁受损程度密切相关，准 确判断梗阻肠段的受损程度对急性肠梗阻的治疗和预后至 关重要。本实验拟通过同时检测幼龄大鼠急性肠梗阻时不同 时相血清中二胺氧化酶(DAO)、丙二醛(MDA)活性的改变， 并结合酶组织化学和超微电镜技术观察肠壁受损时病理形 态学变化，了解二者之间的关系，为临床上急性小儿肠梗阻 的诊断及手术时机的选择提供一定的帮助。 材料和方法：实验选用幼龄Wistar大鼠49只，体重(95 ±12)g，雌雄不分，由河北医科大学动物中心提供。按随机 为对照组，余为实验组。实验前禁食过夜，自由饮水。用3％ 戊巴比妥钠腹腔注射(30mg／kg)，麻醉生效后，固定于鼠台上， 中文摘要 剪毛消毒。于下腹部正中切口入腹，B．G组均距回盲部3cm 处粗丝线结扎小肠肠管，使肠内容物不能通过，不结扎肠系 膜血管，关闭腹腔。A组除不结扎肠管外，其余步骤相同。 分成两段。4。C生理盐水漂洗，一段包埋于OCT中，行连续 冰冻切片，厚度为4um，分别进行酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、 还原型辅酶I四唑氮还原酶染色镜检。另一段修成1nqm3人 小的组织块，于4％戊二醛4。C固定，超薄切片，透射电镜观 察，并摄片记录。同时断头取血4ml，置无菌试管中，分离 血清，进行DA0、MDA活性的定量测定。 结果以；-4-s表示，对所得数据进行t检验处理，检验标 准采用P0．05有统计学意义。 结果：1动物的一般情况正常幼鼠反应灵敏，性情活泼， 肠管颜色鲜艳，有光泽，不扩张。随着梗阻时间的延长，幼 鼠暴躁，易激惹，实验组术后24h梗阻近端肠管扩张充血， 弹性下降。48h后幼鼠精神萎靡，1只死亡，近端肠管极度 扩张，弹性消失，呈暗紫色，部分坏死。72h后幼鼠精神呆 滞，触之无反应，4只死亡，近端肠管大部分坏死。2血清 组升高较显著，在统计学上有显著性差异(PO．05)，BCG组 虽均有升高，但与A组无显著性差异。 升高较显著，在统计学上有显著性差异fP0．05)。BC组虽均 中文摘要 有升高，但与A组无显著性差异。 4肠壁病理学观察结果： 4．1酸性磷酸酶组化染色观察：ACP是溶酶体标志酶，ACP 酶活性处出现红色无定形的沉淀。A组定位于细胞胞浆溶酶 体内；B组红色均匀规则，红染区基本连续；C组绒毛损伤 缺损较大，红色均匀，红染区不连续、不规则；D组绒毛结 构不完整、水肿破坏，ACP溢出呈团块状；E组ACP团块 状增多；F组病变加重，细胞水肿，中间为平滑肌，有团块 结构，薄厚不一；G组溶体不均匀，肌层消失。 4．2碱性磷酸酶组化染色观察：AKP是细胞膜标志酶，AKP 酶活性处为深蓝色。A组定位于绒毛吸收细胞胞浆基底部靠 近核：B组基膜不完整：C组基膜不完整缺失、断裂；D组 水肿明显，平滑肌部分缺失；E组绒毛高度水肿，部分萎缩， 平滑肌破坏，粘膜下增宽，细胞坏死、肿胀，酶释放，酶大 量存在于绒毛间质；F组酶己完全进入间质，中间绒毛无酶； G组酶已完全脱离绒毛基膜和腺体。 43还原型辅酶I四唑氮还原酶染色观察：NADH．TR位于线 粒体中，酶活性处呈蓝紫色。A组定位于胞浆内，细胞边缘 较清楚，蓝紫色；B组绒毛变宽水肿，已出现在问质；C组 间质内团块出现，上皮已不完整、缺损；D组绒毛肿胀变宽、 不连续；E组酶变淡，线粒体数量减少iF组绒毛结构破坏 更重，颜色变浅(不可逆)；G组高度水肿，着色极淡。 4．4超微结构观察：A组肠粘膜上皮示单层柱状上皮，微绒 毛结构完整．排列紧密整齐，粗细长短均一、无肿胀。细胞之 间紧密连接完整，细胞器无明显损伤。杯状细胞分泌旺盛， 分泌小泡之间隔膜清晰完整，无融合现象。B组