蛋白质组学技术较脑出血后6小时与72小时病灶周边脑组织的差异表达蛋白.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………3 研究论文蛋白质组学技术比较脑出血后6小时与72小时病灶周边脑组 织的差异表达蛋白 前言……………………………………………………………………66日IJ 吾…………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………6 结果……………………………………………………………………9 附图……………………………………………………………………1l 附表……………………………………………………………………14 讨论……………………………………………………………………16 参考文献………………………………………………………………25 综j苤…………………………………………………………………………30 致谢…………………………………………………………………………36 个人简历……………………………………………………………………37 细 致 视 局 压 72 血 间上的变化来研究表达于细胞、组织及个体中的全部蛋白质(proteome)， 并从其结构和功能的角度综合分析生命活动的一门科学。蛋白质组学可以 比较两种或更多的样品之间的蛋白质水平，是揭示疾病分子机制，发现疾 病标志蛋白，寻找新的药物靶标的理想工具。 本研究利用蛋白质组学技术对脑出血动物模型血肿周围的脑组织进 行动态研究，比较出血后6小时与72小时的脑组织差异表达蛋白，旨在 深入理解脑出血及出血后水肿的分子机制，并为寻找更为有效的治疗方法 提供实验依据。 方法：利用立体定向仪制作大鼠尾状核脑出血动物模型，在6小时、 72小时的时间点取病灶周围的脑组织为样本，提取脑组织蛋白，进行双 向凝胶电泳：以固相PH梯度等电聚焦为第一向，十二烷基硫酸钠一聚丙 2D Elite分析电 定后以考马斯亮兰R250染色，图像分析软件ImageMaster 泳图谱，得到差异表达蛋白质点；然后对差异表达蛋白进行胶内酶解，所 得肽段用基质辅助激光解析／电离．飞行时间(MALDI．TOF)质谱仪检测， 得到的肽片段质量指纹图谱检索蛋白质数据库，鉴定出差异表达蛋白。 中文摘要 结果：41种蛋白质的表达量在脑出血后72小时组与6小时组有显著 不同，其中19种蛋白质在脑出血后72小时组的脑组织中表达量上调，经 鉴定这些蛋白质为丙酮酸脱氢酶．2，空泡型质子泵．B2，神经胶质原纤维 酸性蛋白质，肌动蛋白相关蛋白．3，胞质氨肽酶，磷酸甘油酸激酶 抑制素，膜联蛋白A5， 14．3．3蛋白-￡，F肌动蛋白加帽蛋白0【．2，p．突触 核蛋白，L．异天冬氨酸蛋白质邻甲基转移酶(PIMT)，腺苷酸激酶同工酶 21种蛋白在脑出血后72小时组的表达量下调，经鉴定为移行性内质网 ATP酶，内质网素，肌动蛋白聚合蛋白，二氯硫辛酸脱氢酶，吡哆醛激酶， 电压依从性阴离子选择性通道蛋白1，碳酸酐酶2，磷酸甘油酸酯变位酶， 谷胱甘肽S．转移酶Yb．3，神经元蛋白22，腺苷高半胱氨酸酶，促分裂原 subunitE 泡型质子泵．El(V-ATPase1)，二氢喋啶还原酶，肽基．脯氨酰 顺．反异构酶，肌酸激酶B，Gt中央丝连接蛋白，膜收缩蛋白a链，果糖． 二磷酸醛缩酶C，GTP结合蛋白G．0c，发动蛋白．1。 结论：我们鉴定出一些可能参与脑出血后应激反应、炎症反应、凋亡、 神经修复等病理生理过程的蛋白。这有利于我们在蛋白质水平上对脑出血 后疾病的病理损伤机制进行全面而整体的认识。 关键词：蛋白质组学；脑组织；脑出血；双向凝胶电泳；差异表达蛋 白质 of for20％～30％ofacute Cerebral accounted hemorrhage and ra