利用异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体br iOsAMT1；1i功能及调控机制.pdfVIP

江苏农业科学　２０１５年第４３卷第１期 — ２７— 杨顺瑛，丛　郁，郝东利，等．利用异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体ＯｓＡＭＴ１；１功能及调控机制［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（１）：２７－３１． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．０１．００８ 利用异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体 ＯｓＡＭＴ１；１功能及调控机制 １，２ １ １，２ １ 杨顺瑛 ，丛　郁 ，郝东利 ，苏彦华 （１．中国科学院南京土壤研究所／土壤与农业可持续发展国家重点实验室，江苏南京２１０００８；２．中国科学院大学，北京 １０００４９） 　　摘要：水稻是一种以铵态氮为主要氮素营养的重要粮食作物，存在至少１２个铵转运体，对水稻铵的吸收起着至关 重要的作用，其中，水稻铵转运体１；１（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａａｍｍｏｎｉｕｍｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ１；１，ＯｓＡＭＴ１；１）是一个在根部和地上部相对组 成型表达的基因。通过异源酵母功能互补法研究水稻铵转运体ＯｓＡＭＴ１；１的功能及其调控机制，结果表明，ＯｓＡＭＴ１；１ ＋ 是一个功能型的铵转运体，和铵的同系物甲基铵（Ｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ，ＭｅＡ ）相比，ＯｓＡＭＴ１；１对铵具有相对较高的选择 性；ＯｓＡＭＴ１；１介导铵的吸收不依赖于外界质子，转运的底物可能是铵离子；ＯｓＡＭＴ１；１介导吸收铵的过程是一个依赖 能量的主动运输过程，对铵的吸收可能不受钙离子参与的磷酸化过程调控。 　　关键词：水稻；铵转运体１；１；酵母功能互补；调控 　　中图分类号：Ｓ５１１．０１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１５）０１－００２７－０４ 　　水稻是世界上最重要的粮食作物之一，生长在淹水条件 ［１］ １　材料与方法 下，以铵为主要氮源 。铵转运体（ａｍｍｏｎｉｕｍｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ， ＡＭＴ）家族基因编码的铵转运系统，是水稻铵吸收和代谢的 １．１　材料 ［１－２］ 重要途径 。水稻中至少存在１２个铵转运体基因，分为两 试验用大肠杆菌菌株为ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＤＨ５，中国科学 α 大家族，ＯｓＡＭＴ１；１－１；３归属于ＡＭＴ１家族，其余９个基因包 院南京土壤研究所实验室保存；所用表达宿主菌株为酿酒酵 括ＯｓＡＭＴ２；１－２；３、ＯｓＡＭＴ３；１－３；３、ＯｓＡＭＴ４、ＯｓＡＭＴ５；１－５； 母铵转运体缺失突变体 ３１０１９ｂ（ｍｅｐ１，ｍｅｐ２ ：：ＬＥＵ２， Δ Δ ［３］ ２归属于ＡＭＴ２家族 ，其中，有关水稻铵转运体 １；１（Ｏｒｙｚａ ｍｅｐ３：：ＫａｎＭＸ２ｕｒａ３），由德国 Ｈｏｈｅｎｈｅｉｍ大学 ＮｉｃｏＶｏｎ Δ ｓａｔｉｖａａｍｍｏｎｉｕｍｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ１；１，ＯｓＡＭＴ１；１）基因的表达规律 Ｗｉｒéｎ教授惠赠，在外界铵作为唯一氮源且浓度低于５ｍｍｏｌ／Ｌ ［５］ 及超表达转基因水稻的研究取得一定进展。ＯｓＡＭＴ１；１在根 时，此菌株不能正常生长 ；酵母表达载体 ｐＹＥＳ２，购于 部和地上部更倾向于组成型表达，可能负责根部从外界吸收 Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司