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第五章反胶团萃取与双水相萃取资料.ppt

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第五章反胶团萃取与双水相萃取资料.ppt

反胶团溶液形成的条件和特性 反胶团萃取蛋白质的基本原理 影响反胶团萃取蛋白质的主要因素 反胶团萃取设备 反胶团萃取的应用 基本概念 ?表面活性剂分子的两亲性质使之在水溶液中能自发形成结构有序的多分子聚集体,通常称为胶团。胶团具有表面活性剂烷烃链构成的疏水内核和亲水基团包裹着的外壳,即所谓的核-壳结构 。 基本概念 反胶团是指当油相中表面活性剂的浓度超过临界胶束浓度后, 其分子在非极性溶剂中自发形成的亲水基向内、疏水基向外的具有极性内核(polarcore)的多分子聚集体。 基本概念 反胶团是表面活性剂分子溶于非极性溶剂中自发形成的聚集体 ,其中表面活性剂的极性头朝内而非极性头朝外与有机溶剂接触。胶团内可溶解少量水而形成微型水池,蛋白质进入微水池中,可随反胶团转入有机溶剂,但不与有机溶剂直接接触,反胶团萃取就是利用这一特性进行蛋白质分离的方法,反胶团溶液是宏观上透明均一的热力学稳定体系。 成本低 选择性高 操作方便 放大容易 萃取剂 (反胶团相 )可循环利用 蛋白质不易变性等优点 表面活性剂 反胶团(reversed micelle)是表面活性剂分散于连续 有机相中一种自发形成的纳米尺度的聚集体,所以表面活 性剂是反胶团溶液形成的关键。 表面活性剂是由亲水憎油的极性基团和亲油憎水的非极 性基团两部分组成的两性分子,可分为阴离子表面活性 剂、阳离子表面活性剂和非离子型表面活性剂。 反胶团萃取设备 要实现反胶团萃取的工业化,关键之一是开发适用于反胶团萃取的高效分离设备 1、膜萃取器 膜萃取器有管状超滤膜和中空纤维膜两种。 (1)管状超滤膜 用管状陶瓷超滤膜截留含有磷脂酶的反胶团,实现了对生物产品的部分分离。 含有磷酯酶的发酵液经过泵进入到陶瓷超滤膜组件中,磷酯酶被截留在膜内,萃余相则返回到反应器,从而实现磷酯酶的分离。 (2) 中空纤维膜 中空纤维管是另一类被广泛用于液-液分离的膜萃取器。它具有很大的比表面积,且与反胶团技术相结合能减少蛋白质的失活,是一项很有实用前景的生物分离技术。 将亲和配基(活性色素辛巴蓝)加入到大豆卵磷酯-正已烷系统中,制成亲和反胶团相,并将此胶团相固定于聚丙烯中空纤维膜内,从而构建起亲和反胶团萃取膜的分配色谱装置(AMPC)。 2、离心萃取器 反胶团溶液-水-蛋白质所组成的萃取体系,由于表面活性剂的存在,界面张力低,易乳化。另外,由于萃取的目标产物是蛋白质,易变性失活。为了尽量避免蛋白质的变性,应尽量缩短操作时间,因而反胶团离心萃取是一项很合适的蛋白质萃取分离技术。 3、混合澄清槽 混合-澄清式萃取器是一种最常用的液-液萃取设备,该设备由料液与萃取剂的混合器和用于两相分离的澄清器组成,可进行间歇或连续的液-液萃取。 但该设备最大的缺点是反胶团相与水相相混合时,混合液易出现乳化现象,从而增加了相分离时间。 用2个混合槽和2个澄清槽组成连续萃取/反萃取流程,用TOMAC/0.1%(v/v)辛醇-异辛烷的反胶团体系循环萃取分离α-淀粉酶,控制第一级水相中酶浓度在较低水平上,使失活速度很小,将α-淀粉酶浓缩了8倍,酶活力损失约30%。 对该过程优化,在反胶团中加入非表面活性剂,以提高分配系数,同时加大搅拌速度,以提高传质速率,第二级反萃液中α-淀粉酶的活力回收率为84%,浓缩了17倍。 思考题 * * 第五章 反胶团萃取与双水相萃取 一、反胶团萃取 何谓胶团、反胶团? 何谓胶团、反胶团 ? 反胶团萃取 反胶团萃取的特点 反胶团溶液形成的条件和特性 反胶团溶液形成的条件和特性 阴离子表面活性剂 在反胶束萃取蛋白质的研究中,用得最多的是阴离子表面活性剂AOT(AerosolOT),其化学名为丁二酸-2-乙基己基磺酸钠 该表面活性剂容易获得,其特点是具有双链,极性基团较小、形成反胶束时不需加助表面活性剂,并且所形成的反胶束较大,半径为170 nm,有利于大分子蛋白质进入。 反胶团溶液形成的条件和特性 阳离子表面活性剂 常使用的阳离子表面活性剂名称和结构如下: (1)CTAB(溴化十六烷基三甲胺/十六烷基三甲基胺溴) (2)DDAB(溴化十二烷基二甲铵) 反胶团溶液形成的条件和特性 阳离子表面活性剂 常使用的阳离子表面活性剂名称和结构如下: (3) TOMAC(氯化三辛基甲铵) 反胶团溶液形成的条件和特性 临界胶团浓度 要形成胶团或反胶团溶液,表面活性剂需达到一定浓度。临界胶束浓度是形成胶团或反胶团的表面活性剂的最低浓度,用CMC表示。 反胶团溶液形成的条件和特性 胶团、反胶团的形成 将表面活性剂溶于水中,当其浓度超过临界胶束浓度(

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