山苍子油对小鼠念珠菌阴道炎影响的实验研究.pdfVIP

中文摘要 山苍子油对小鼠白念珠茵阴道炎影响的实验研究 摘 要 目的：本研究通过构建白念珠菌阴道炎小鼠模型，观察 山苍子油对白念珠菌阴道炎是否具有治疗及止痒作用，并筛 选出可以外用治疗白念珠菌阴道炎的山苍子油的浓度，为山 苍子油的临床应用提供实验依据。 方法： 1白念珠菌阴道炎动物模型的构建：6周龄清洁级雌性 昆明小鼠10只。于接种前6天开始隔日皮下注射lmg／ml苯 甲酸雌二醇油剂0．1ml，使之处于假发情状态，直至实验结 念珠菌孢子接种量为5X104efu)，灌注入所有小鼠阴道内。 接种菌后的第2、第4天分别处死5只小鼠取阴道组织送组 织病理学检查。小鼠处死前均用拭子取样涂片真菌镜检。 2山苍子油对小鼠阴道黏膜的刺激实验：6周龄清洁级 雌性昆明小鼠50只，随机分成5组，即I组、II组、Ⅲ组、 Ⅳ组、V组，每组10只。II组、ⅡI组、Ⅳ组、V组分别给 予4％、8％、12％、16％山苍子油，I组给予相同剂量生理 盐水。每天阴道内给药1次，每次30al，连续7天。给药7 天内观察小鼠的饮食、活动、精神状态、粪便等。末次给药 24小时后，处死动物，取阴道组织送组织病理学检查。 3山苍子油对白念珠菌阴道炎小鼠模型的治疗作用实 验：将造模成功的45只小鼠，随机分为5组，即A组、B 组、C组、D组、E组，每组9只。B组、c组、D组每日 中文摘要 分别阴道内给予4％、8％、12％山苍子油1次，每次3叽l， 连续7天，A组给予同等剂量生理盐水，E组给予同等剂量 氟康唑溶液。分别于治疗0天、5天、7天及21天后，用 10倍系列稀释。用20Ⅳl微量加样器滴种于改良沙堡培养基 平皿上，自高稀释度滴种，每个稀释度滴种3滴。37C培养 48小时，计数菌落形成单位(CFU)。 4止痒实验：清洁级健康豚鼠30只。实验前先将豚鼠右 后足背剪毛，次日用粗砂纸擦伤右后足背去毛处，面积约 1crnz，随机分为5组，即甲组、乙组、丙组、丁组、戊组， 每组6只。乙组、丙组、丁组用药分别为4％、8％、12％山 苍子油lml／只，甲组给予相同剂量生理盐水，戊组给予丁酸 氢化可的松乳膏0．059／只，局部用药30分钟后，用0．05％磷 酸组织胺5叽l涂抹擦伤皮肤，3分钟内若豚鼠不出现舔擦伤 皮肤动作，重复操作，直至出现豚鼠回头舔后足为止。以最 后出现豚鼠回头舔后足时所给予的磷酸组织胺总量为致痒 阈，记录涂抹磷酸组织胺的次数及用量。 应用SPSSll．5统计软件处理数据。计量资料以均数± 标准差表示。阴道灌洗液载菌量及磷酸组织胺致痒阂结果采 为显著性界限。 结果： 1白念珠菌阴道炎动物模型的构建：造模后第2天，涂 片真菌镜检可见大量孢子和阴道上皮细胞。组织病理切片中 阴道壁黏膜浅层可见大量孢子。第4天，涂片真菌镜检可见 较多假菌丝和芽生孢子，大量阴道上皮细胞。组织病理切片 中文摘要 阴道壁黏膜浅层中可见大量假菌丝和孢子。 2山苍子油对小鼠阴道黏膜刺激实验：给药7天内，各 浓度山苍子油组小鼠的饮食、活动、精神状态、粪便等均正 常，无死亡现象，与生理盐水组无明显差异。组织病理学检 查结果：I组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组4组小鼠阴道黏膜表皮层 次清楚，均可见单层排列的柱状基底细胞；黏膜下血管未见 明显扩张、充血；结缔组织轻度水肿；真皮内少量炎细胞浸 润。V组小鼠阴道黏膜表皮细胞内水肿，棘层细胞明显空泡 样变性，基底细胞液化变性；黏膜下血管明显扩张、充血； 结缔组织水肿；真皮内较多炎细胞浸润。表明4％山苍子油、 8％山苍子油、12％山苍子油刺激性小，可以用于外用治疗白 念珠菌阴道炎小鼠模型的实验研究；16％山苍子油对小鼠阴 道黏膜有明显的刺激作用，不宜用于治疗小鼠白念珠菌阴道 炎。 3山苍子油对白念珠菌阴道炎小鼠模型的治疗作用：用 药7天后，A组、B组、C组、D组及E组小鼠阴道灌洗液菌 5．31-_．0．48。各个浓度山苍子油均能降低阴道灌洗液菌落计 数，与生理盐水组比较有显著性差异俾O．05)。随着山苍子 油治疗浓度的增高，菌落计数逐渐下降，且差异有显著性 (P0．05)。 4止痒实验：各个浓度山苍子油均能提高豚鼠对磷酸组 织胺的致痒阈，与生理盐水组比较有显著性差异(Po．05)。