云南瑞丽边境地恶性疟原虫pfcrt基因72、74、75、76位点突变与氯喹抗性的研究.pdfVIP

点突变与氯喹抗性的研究 研究生： 王丰莲 导 师： 杨亚明周红宁教授 摘 要 目的：为探明云南省德宏瑞丽边境地区恶性疟原虫氯喹抗性基因pfcrt的72、73、74、 75、76位点氨基酸突碧B睁征，拟对被公认的假定氯喹抗性基因突变防险区进行分子生 物学研究，拐强拐嘣钾耐蜘苣原虫列絮哩鞋材奎甍睨型与基因型的关系。以便绂凋勰姚星疟原 虫抗药性检测新方法奠定基础。 方法：本实验收集恶性疟原虫感染患者的全血冻存样本36例。选符合要求的28 例进行体外敏感性测定，采用CheleX8100煮沸．法，提取恶幽鬯臌因组DNA。应用 列和氨基酸序列。 1／# 结果：(1)28例恶性疟原虫感染患者，经体外测定，按疟原虫能在≥8 pmo 中发育至裂殖体为对该药有抗性，反之为敏感。28例样本显示抗性，抗性率 100％。(2)经巢式PCR扩增后直接测序分析，云南瑞丽边境地区恶性疟原虫氯 喹抗性突变型真实存在，呈CVIET单体型。且抗性基因突变型与这一地区的氯 酸突变呈CVIET单体型，且与东南亚和非洲的一致。 结论t(1)云南省瑞丽恶性疟原虫氯喹抗性真实存在，基因pfcrt内已知可能与氯喹 抗眭有关的基因位点突变型呈CVIET单体型；(2)恶性疟原虫pfcrt基因的72、 74、75、76氨基酸编码的突娥氯喹抗性捌完蝴：(3)初步认为云南 瑞丽恶性疟原虫pfcrt基因的K76T位点氨基酸突变可作为知氆步．性的分子生物学 基因标志。本研究第一次报道了云南瑞丽抗知喹恶瞄宦原文铆离-株有明显的CVIET单 倍体基因型。 关键词：恶性疟原虫；pfcrt基因：氨基酸突变：氯端： Researchonthe mutationsof72，74，75，76 of positions thePlasmodium Geneand falciparum pfcrt chloroquine resistanceat border Province Ruili，a area，Yunnan WANG ian Postgraduate： Feng—l ZHOU Supervisor,Prof．YANGYa-mingHong—ning ABSTRACT findoutthecharacteristicsofaminomutationsof objeetive：To ofPlasmodium 72，74，75，76positions at falciparumpfcrtgene Ruili， Yunnan doneon Dehong， Province，molecularwas the biologystudy