姜黄素对肿瘤细异常甲基化抑制作用研究.pdfVIP

中文摘要 目的：姜黄素(curcumin)是从我国传统中药姜黄根茎中提取的一种 植物多酚。现代药理学研究表明，姜黄素具有抗氧化、抗突变、抗肿瘤等 多方面的药理作用，体外实验及动物实验证实，姜黄素可以在多个靶点抑 制肿瘤细胞的生长和繁殖，抑制大鼠皮肤癌、胃癌、十二指肠癌、结肠癌 及乳腺癌等的发生。目前研究认为其抗肿瘤可能涉及诱发肿瘤细胞凋亡、 阻断肿瘤细胞信号传导通路、抗氧化和抑制肿瘤血管生成等方面。但由于 肿瘤的发生是一个多因素、多基因相关的复杂过程，姜黄素的抗肿瘤机制 研究有待进一步深入。 i 近年来，表遗传(epigenetc)机制在肿瘤发生中的作用正引起高度 关注，它是发生在基因表达水平的可遗传的、无DNA序列的变化。DNA甲 基化就是一种与肿瘤形成密切相关的表遗传机制，研究显示，DNA甲基化 异常可引起基因表达水平的明显改变，是细胞癌变过程中的一个早期事 件。同时，DNA甲基化也是一个可逆的过程，因此此过程有可能成为很好 的药物干预靶点。有报道初步显示姜黄素可能是潜在的甲基化抑制剂，本 文从ONA甲基化角度探讨姜黄素抗肿瘤的表遗传机制，研究了不同浓度的 姜黄素对体外培养的肿瘤细胞的生长抑制作用及对p16基因和MGMT基因 甲基化状态的影响，为姜黄素等中药成分的抗肿瘤机理研究提供一个新的 途径，同时为姜黄素的临床应用提供科学的理论依据。 方法：1．将人胃癌细胞株SGC-7901，人宫颈癌细胞株HeLa，人肝癌 细胞株HepG2在体外培养至对数生长期，加入不同浓度的姜黄素(20、40、 60“mol／L)分别处理三种肿瘤细胞48小时。在倒置显微镜观察不同浓度 变；运用基于酶标仪的MTT方法检测肿瘤细胞的增殖情况。 2．利用甲基化特异性PCR(Methylation-specifiCPCR，MSP)方法 6基因和MGMT基因甲 检测不同剂量的姜黄素作用前后三种肿瘤细胞中p1 基化状态的改变。 基因表达水平。 生长与增殖，并诱导三种肿瘤细胞发生凋亡。 2．SGC一79 01细胞、HeLa细胞、HepG2细胞p16基因和MGMT基因的 启动子区CpG岛呈异常甲基化状态。用姜黄素处理后，低浓度(2o“mol／L) 的姜黄素对三种肿瘤细胞p16基因和MGMT基因无明显的去甲基化作用， 中浓度40“mol／L与高浓度(60u 程度下降。 因重新表达或表达增强，且呈一定的剂量依赖性。 明显抑制作用，且表现出剂量依赖性(P0．01)；中浓度和高浓度的姜黄 素溶液对三种肿瘤细胞p16基因和MGMT基因具有一定的去甲基化作用。 姜黄素可使肿瘤细胞中的p16基因和MGMT基因重新表达及表达增强。本 研究显示姜黄素对甲基化异常的抑制作用是其一种可能的抗肿瘤机制，为 姜黄素应用于肿瘤临床提供了理论依据。 关键词： 姜黄素；DNA甲基化；p16； MGMT ontheAbnormal Inhibition Study methylation ofcurcumin cells ontumor Speciality：ClinicalLaboratoryDiagnostics Author：Chenxin Tutor：Yao qunfeng ABSTRACT eetive： obj Curcuminisoneofthe fromturmericrhizomeof plantpolyphenol traditionalChinesemedicine．Modernstudieshaveshownthat pharmacology curcuminhas